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黄刺玫果实醇提物的抗氧化及抗血栓作用实验研究

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前言

第一部分 黄刺玫果实醇提物体内及体外抗氧化作用

1.材料与方法

2 结 果

3 讨 论

4 结 论

第二部分 黄刺玫果实醇提物抗血栓作用及其作用机制

1 材料与方法

2 结 果

3 讨 论

4 结 论

参考文献

综述:天然抗氧化活性成分研究

致谢

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摘要

目的:
  山西拥有十分丰富的黄刺玫资源,但黄刺玫刺玫果实的利用率低。本论文对黄刺玫果实醇提物的抗氧化及抗血栓作用进行探究,为接下来进一步开发利用黄刺玫果作为保健食品提供了丰富的实验依据。
  方法:
  以抗坏血酸为阳性对照,采用DPPH自由基清除法、邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲亚铁法,测定果实提取物不同极性萃取部分对DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)的清除能力;采用亚硝酸钠-硝酸铝方法测定总黄酮含量,福林-酚方法测定多酚含量。筛选出抗氧化活性最强的部分,并对其进行体内抗氧化实验,以D-半乳糖造模成功小鼠为模型,连续给药一个月,测定各剂量组血清及肝脏匀浆中的丙二醛含量及超氧化物歧化酶活力,综合评价黄刺玫果的抗氧化活性。
  将小鼠随机分为空白对照组,高、中、低三个剂量组和阳性对照组,连续给药5 d,注射角叉菜胶诱导小鼠尾静脉血栓,分别在24 h和48 h后测量黑尾长度。将小鼠分为五组,各组动物按0.2mL/10g每天灌胃给予药液,连续给药7d后,采用尾静脉注射胶原蛋白-肾上腺素诱导剂,诱导血栓形成的方法建立小鼠肺栓塞模型,通过计算小鼠成活率,观察黄刺玫果醇提物对肺栓塞形成的影响。将不同浓度的黄刺玫果实醇提物,分别加入大鼠富血小板血浆中,用多功能血小板聚集仪测定ADP诱导血小板的最大聚集率。体外测定不同浓度组黄刺玫果醇提物血浆凝血酶时间(PT)、凝血酶时间(TT)、部分凝血酶原时间(APTT)。在0、4、8、24 h时,分别称量黄刺玫果实醇提物高、中、低剂量组(60,30,15 mg/ml),空白对照组和尿激酶阳性对照组的家兔全血凝块质量,计算全血凝块溶解率。
  结果:
  体外抗氧化实验中,在一定浓度范围内黄刺玫果醇提物的不同极性部分清除三种不同自由基的能力随着浓度的增加而升高。其中乙酸乙酯部分对DPPH·、·OH、O2-·的清除能力最强,IC50分别是18.52、737.00和605.50μg/mL。在体内抗氧化实验中,与模型组相比,高、中、低三个剂量组肝脏匀浆和血清的SOD活力均升高(P<0.01)。
  与空白组比较,黄刺玫醇提物高、中剂量组小鼠相对黑尾长度及相对黑尾长度抑制率明显减少(P<0.05)。与空白组比较,黄刺玫果醇提物高、中剂量组显著增加小鼠存活率,其保护率分别为58.3%和50%。与空白对照组比较,高、中、低剂量组黄刺玫果醇提物的血小板最大聚集均明显减少(P<0.01)。与空白组比较,黄刺玫果醇提物均可显著延长正常人血浆APTT,PT,TT时间(P<0.01)。与空白组比较,在4,8和24 h时,黄刺玫果醇醇提物高、中剂量组的全血凝块溶解率均显著增加(P<0.01)。
  结论:
  黄刺玫果醇提物的乙酸乙酯部分为抗氧化活性部位,在体内和体外均有良好的抗氧化活性,是一种很有潜力的抗氧化剂。黄刺玫果实具有良好的抗凝和抑制实验性血栓作用形成的作用。

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