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蕤核叶黄酮类化合物提纯及抗氧化活性研究

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摘要

1.绪论

1.1 扁核木属的概况

1.1.1 形态学特征

1.1.2 分布

1.1.3 价值

1.2 扁核木属研究进展

1.3 黄酮类化合物的研究概况

1.3.1 黄酮类化合物的理化性质

1.3.2 黄酮类化合物的颜色反应

1.3.3 黄酮类化合物的提取方法

1.3.4 黄酮类化合物的纯化与分离

1.3.5 黄酮类化合物的生理活性

1.4 选题的目的与意义

2.材料与方法

2.1 地域概况

2.2 材料用品

2.2.1 试验材料

2.2.2 主要生化及化学试剂

2.2.3 主要仪器及设备

2.3 研究内容

2.3.1 总黄酮含量的测定

2.3.2 蕤核叶总黄酮提取工艺的研究

2.3.3 蕤核叶黄酮类化合物的颜色反应

2.3.4 蕤核叶总黄酮纯化研究

2.3.5 蕤核叶总黄酮体外抗氧化性能研究

3.结果与分析

3.1 蕤核叶黄酮类化合物含量测定

3.2 蕤核叶总黄酮提取工艺的结果分析

3.2.1 超声波法提取蕤核叶中总黄酮工艺研究结果分析

3.2.2 加速溶剂萃取法提取蕤核叶总黄酮的工艺研究结果分析

3.2.3 超声波法和加速溶剂萃取法的对比结果

3.3 蕤核叶黄酮类化合物颜色反应的结果

3.4 蕤核叶总黄酮纯化的研究

3.4.1 吸附树脂种类筛选结果

3.4.2 AB-8纯化蕤核叶粗黄酮条件的确定

3.5 蕤核叶黄酮体外抗氧化性能分析

3.5.1 猪油抗氧化作用的效果

3.5.2 超氧阴离子清除能力检测效果

3.5.3 羟基自由基清除能力检测效果

3.5.4 亚硝酸根清除能力检测效果

4.讨论

4.1 蕤核叶黄酮类化合物的提取

4.2 蕤核叶黄酮类化合物的分离纯化

4.3 蕤核叶黄酮类化合物的生物活性

5.结论

致谢

参考文献

附录

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摘要

蕤核(PrinsepiaunifloraBatal.)蔷薇科(Rosaceae)扁核木属(Prinsepia)的落叶灌木,属于丛生型,喜光、耐旱、耐寒,对环境的适应能力很强,具有保水的作用,是黄土高原的乡土植物之一。果仁可以入药,治疗眼病,是我国传统的中药材。黄酮类化合物是一类广泛存在于植物体中的重要次生代谢产物,具有抗菌、抗癌、抗病毒等生物活性,是目前次生代谢物质研究的热点之一。
   蕤核是一种重要的药用植物,也是一种经济价值较高的野生果树资源。相关蕤核报道尚不多见,研究还处于起步阶段。本文以蕤核为研究对象,对其叶片中黄酮类化合物进行提取、纯化以及抗氧化的研究,为蕤核的综合利用和野生资源开发提供一定的技术依据。本论文的研究内容及结果如下:
   1.通过超声波提取方法,对蕤核叶黄酮类化合物的提取工艺进行研究。探讨提取温度、乙醇浓度、提取时间以及料液比四个因素对蕤核叶黄酮提取率的影响,正交试验分析,得到各因素主次顺序:料液比>乙醇浓度>提取时间>提取温度,最佳提取工艺是选用60%乙醇溶液,料液比为1∶30,在40℃提取70min。
   2.运用加速溶剂萃取法,探讨了乙醇浓度、炉体加热温度、静态萃取时间以及萃取循环次数四因素对蕤核叶黄酮提取率的影响,经过正交试验分析,得到各因素的主次顺序:炉体加热温度>乙醇浓度>静态萃取时间>循环次数。采用最佳的提取工艺,蕤核叶黄酮的提取量可达到9.1237mg·g-1。
   3.通过树脂的吸附率、解吸率及动力学曲线为指标,研究不同型号大孔吸附树脂对蕤核叶黄酮的吸附性能,试验结果显示:AB-8型大孔吸附树脂对蕤核叶黄酮具有较好的纯化效果,选用AB-8型大孔吸附树脂纯化蕤核叶黄酮最适合。
   4.大孔吸附树脂AB-8型纯化蕤核叶黄酮的试验中,考察上样液的浓度、上样液的用量、洗脱剂的浓度及用量四个因素对蕤核叶黄酮提取液的影响,得到最佳工艺条件为蕤核叶黄酮提取液浓度在1~2mg·mL-1,上样量与树脂的比例为8∶1,洗脱剂选用60%乙醇溶液,洗脱剂用量4BV。
   5.研究蕤核叶黄酮体外抗氧化的生物活性。体外抗氧化研究显示,蕤核叶黄酮提取物对猪油具有抗氧化的效果,对超氧阴离子、羟基自由基及亚硝酸根具有清除能力,且存在着一定的量效关系。

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