嗜热链球菌硒多糖高产菌株的筛选及发酵特性的研究

摘要

硒(Se)被证实是人体及动物体内必须的微量元素，随着对硒功能的了解，人们对它的关注度逐渐提高，相关报道也越来越多。由于天然食物中的硒含量无法满足人类需求，越来越多的研究致力于富含有机硒的食品、保健品以及药品的开发。硒多糖作为一种有机硒化合物，具有多种优点，因此将硒多糖作为生物补硒产品已成为国内外研究焦点。目前利用嗜热链球菌作为材料获取硒多糖的相关研究相对少，故本试验采用嗜热链球菌作为发酵菌株，发酵生产硒多糖，主要研究了以下内容：
　　1.以试验室保存的嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）S1作为出发菌株，活化后制成菌悬液，37℃下经0.1mol/L的亚硝酸处理15min后，再用紫外线照射3min，筛选获得菌株S13，测得其胞外多糖和多糖中硒含量分别为0.613g/L和663μg/g，相比出发菌株分别提高了0.215g/L和241μg/g，传代培养结果表明菌株S13遗传稳定性良好。
　　2.将S13作为出发菌株，以胞外多糖产量和多糖中硒含量为检测指标，采用单因素和正交试验法，对其发酵特性进行了研究。获得的最佳发酵条件是：在接种量为4％，装液量为100mL/250mL，转速为120r/min的前提下，乳糖浓度为10g/L，MnSO4浓度为0.4g/L，硒浓度为30mg/L，初始pH为7.0，培养时间为30h，培养温度为42℃。在该条件下培养得到多糖产量为0.826g/L，多糖中硒含量为754μg/g。
　　3.对S13富硒发酵产生的硒多糖与不添加硒的S13胞外多糖进行了体外抗氧化活性比较试验：分别测定了各样品对·OH、O2-·的清除率以及还原能力，结果表明在浓度为50~500μg/mL范围内时，随着多糖浓度的升高，抗氧化能力呈上升趋势。同时与培养基中不添加硒的嗜热链球菌胞外多糖相比，硒多糖对·OH、O2-·的清除率显著上升，总还原力显著升高，表明有机硒对于提高嗜热链球菌胞外多糖抗氧化活力具有重要作用。

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第一章 文献综述

1.1嗜热链球菌的研究概况

1.2硒的研究概况

1.3硒多糖的研究概况

1.4本课题的研究目的和意义

第二章 复合诱变选育嗜热链球菌硒多糖高产菌株

2.1材料与方法

2.2结果与分析

2.3讨论

第三章 嗜热链球菌硒多糖高产菌株发酵特性的研究

3.1材料与方法

3.2结果与分析

3.3讨论

第四章 嗜热链球菌硒多糖体外抗氧化活性研究

4.1材料与方法

4.2结果与分析

4.3讨论

第五章 结论

参考文献

攻读学位期间取得的研究成果

致谢

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