青海省柴达木盆地盐湖细菌Ab9、Bo5抑菌活性物质的分离与鉴定

摘要

盐湖微生物由于其特殊的代谢类型，可产生许多具有特殊性质的次级代谢产物，从而使盐湖成为人们开发新药的宝贵资源。青海省柴达木盆地有大量的盐湖分布，并且盐湖所处的地理位置海拔高，盐湖演化、形成经历的历史久远，湖水的含盐度极高、化学成分多，使青海省盐湖具有更为特殊的生境条件。因此通过化学手段研究青海省盐湖中微生物所产生的次级代谢产物，对天然产物新资源的开发具有很好的应用价值。
　　 研究采用稀释涂布平板法及平板划线分离法对采集的七种样品进行了分离、纯化试验，样品包括：茶卡盐湖的淤泥、小柴旦盐湖的淤泥、昆特依湖区的表层盐及淤泥、一里坪干盐湖盐土、察尔汗盐湖区的察尔汗干盐湖的盐块、台吉乃尔盐湖区：西台吉乃尔湖的淤泥、东台吉乃尔湖的盐块。选取金黄色葡萄球菌、虅黄微球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母、酿酒酵母、曲霉菌为供试病原菌，采用传统五点对峙法和双层琼脂扩散法对分离得到的184株菌株进行筛选试验，最终选取抑菌谱广、抑菌活性强的细菌Ab9和Bo5为供试菌,并进行了生物学特性试验。
　　 采用吸附柱色谱法、凝胶柱色谱法以及薄层色谱法对细菌Ab9和Bo5供试菌发酵液中的抑菌活性物质提取分离，通过活性测试筛选出目标化合物，用高效液相色谱仪制备目标化合物，通过核磁共振法确定目标化合物的化学结构。最终从供试菌Ab9中得到了8种化合物：3-甲基-6-仲丁基哌嗪-2，5-二酮、3-甲基-6-异丁基哌嗪-2，5-二酮、5-异丁基-六氢吡咯并[1，5-a]吡嗪-3，6-二酮、5-甲苯-六氢吡咯并[1，5-a]吡嗪-3，6-二酮、5-异丙基-六氢吡咯并[1，5-a]吡嗪-3，6-二酮、5-仲丁基-六氢吡咯并[1，5-a]吡嗪-3，6-二酮、六氢吡咯并[1，5-a]吡嗪-3，6-二酮、5-[3-吲哚甲基]-六氢吡咯并[1，5-a]吡嗪-3，6-二酮，从细菌Bo5中得到了四种化合物：5-异丙基-六氢吡咯并[1，5-a]吡嗪-3，6-二酮、N-[3-吲哚乙基]乙酰胺、4-[N-(3-吲哚乙基)甲酰胺基]噻唑-2-乙酮、Iturin A4。