高原低氧对药物代谢酶CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1活性和表达的影响

摘要

目的：探讨高原自然低氧环境中，急慢性缺氧对大鼠CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1的活性、蛋白及mRNA表达的影响，为高原地区合理用药提供参考依据。
　　方法：将平原（西安）大鼠分组为5组，具体为：①平原对照组（P，西安，海拔：390 m，大气氧分压：20 kPa）、②中度海拔急性缺氧组（AMH，平原大鼠急进共和县后正常饲养1天，海拔：2900 m，大气氧分压：15.1 kPa）、③中度海拔慢性缺氧组（CMH，平原大鼠急进共和县后正常饲养40天，海拔：2900 m，大气氧分压：15.1 kPa）、④高度海拔急性缺氧组（AHH，平原大鼠急进玛多县花石峡镇后正常饲养1天，海拔：4300 m，大气氧分压：12.4 kPa）、⑤高度海拔慢性缺氧组（CHH，平原大鼠急进玛多县花石峡镇后正常饲养40天，海拔：4300 m，大气氧分压：12.4 kPa）。
　　活性评价实验，CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1的探针药物分别采用咖啡因、苯妥英钠、奥美拉唑及睾酮，采用高效液相色谱（RP-HPLC）法，检测各探针药物的原型及代谢产物的浓度，分别评价各酶活性，探讨在高原急慢性缺氧条件下，CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1酶活性的变化。蛋白定量实验，采用酶联免疫吸附法（ELISA），分别测定各组大鼠肝微粒体内CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1的蛋白表达，探讨在高原急慢性缺氧条件下，几种酶蛋白表达的变化。mRNA定量实验，采用实时荧光定量PCR（qPCR）法，分别测定各组大鼠微粒体内 CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1的mRNA相对表达，探讨在高原急慢性缺氧条件下，几种酶mRNA相对表达的变化。
　　结果：在高原自然低氧环境下，大鼠CYP1A2酶活性、蛋白表达和mRNA表达均显著降低；与平原对照组大鼠相比较，中海拔急、慢性缺氧组（AMH、CMH）及高海拔急、慢性缺氧组（AHH、CHH）大鼠CYP1A2活性分别显著降低62.33％、60.75%、60.75%、53.82%；蛋白表达分别显著降低56.26%、63.14%、59.08%、62.08%；mRNA表达分别显著降低51.08%、37.23%、32.90%、30.74%。高原急慢性缺氧对大鼠CYP2C11酶活性、蛋白表达和mRNA的表达均无显著影响；与平原对照组大鼠相比较，中海拔急、慢性缺氧组（AMH、CMH）及高海拔急、慢性缺氧组（AHH、CHH）大鼠 CYP2C11酶活性、蛋白表达和 mRNA的表达均无显著变化。与平原对照组大鼠相比较，大鼠CYP2C22的活性在高海拔急性缺氧组（AHH）显著增加了117.65%，而在其他各组无显著变化；其蛋白表达及 mRNA表达在中海拔急、慢性缺氧组（AMH、CMH）及高海拔急、慢性缺氧组（AHH、CHH）均无显著变化。与平原对照组大鼠相比较，大鼠CYP3A1的活性在中、高海拔慢性缺氧组（CMH、CHH）分别显著降低43.02%、50.00%；蛋白表达在中、高海拔慢性缺氧组（CMH、CHH）分别显著降低42.23%、30.51%；活性及蛋白表达在中、高海拔急性缺氧组（AMH、AHH）均无显著性变化；与平原对照组大鼠相比较，大鼠CYP3A1的mRNA表达在中度海拔急、慢性缺氧组（AMH、CMH）分别显著降低39.49%、32.63%，在高度海拔慢性缺氧组（CHH）显著降低33.67%，在高度海拔急性缺氧组（AHH）无显著变化。
　　结论：①高原急慢性缺氧显著降低大鼠CYP1A2酶活性、蛋白表达和mRNA的表达；②高原急慢性缺氧对大鼠CYP2C11酶活性、蛋白表达和mRNA的表达均无显著影响；③除高度海拔急性缺氧组大鼠CYP2C22酶活性显著升高外，高原急慢性缺氧对大鼠CYP2C22酶活性、蛋白表达和mRNA的表达无显著影响；④高原急性缺氧对大鼠 CYP3A1酶活性和蛋白表达无显著影响，但高原慢性缺氧显著降低大鼠CYP3A1酶活性、蛋白表达和mRNA表达。

目录

声明

主要符号对照表

第1章 引言

第2章 高原低氧对药物代谢酶CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1活性的影响

2.1 材料与方法

2.2 结果

2.3 讨论

2.4 小结

第3章 高原低氧对药物代谢酶CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1蛋白表达的影响

3.1 材料与方法

3.2 结果

3.3 讨论

3.4 小结

第4章 高原低氧对药物代谢酶CYP1A2、CYP2C11、CYP2C22和CYP3A1 mRNA表达的影响

4.1 材料与方法

4.2 结果

4.3 讨论

4.4 小结

第5章 结论

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文

致谢

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