鹅绒藤总生物碱体外抗肿瘤活性的研究

摘要

目的：研究鹅绒藤总生物碱（CynanchumChinenseTotalAlkaloid，CCTA）对体外培养的肿瘤细胞株的增殖抑制作用及其作用机制的初步探索。
　　方法：以人宫颈癌细胞Hela、人结肠癌细胞SW480、人前列腺癌细胞PC3为研究对象，以小鼠成纤维细胞3T3作为正常对照，用不同浓度的鹅绒藤总生物碱提取物（CCTA）分别对上述细胞作用24h、48h、72h、96h后，在普通光学显微镜下观察细胞形态的变化，用MTT法检测其生长抑制率，选取对CCTA敏感的细胞株，用流式细胞仪检测不同浓度下的CCTA对其细胞周期及凋亡率的影响。
　　结果：①经过CCTA处理，Hela细胞和SW480细胞在光学显微镜下可见细胞形态发生明显变化，细胞密度减小，伸展性减弱、细胞边缘发亮，贴壁性减弱，胞质内可见发泡现象；而3T3细胞和PC3细胞则变化不明显；②与正常对照组相比，CCTA对Hela细胞及SW480细胞的抑制作用较为明显，而对PC3和3T3细胞则无明显抑制作用；且随着CCTA浓度的增加以及作用时间的延长，对Hela和SW480细胞的抑制作用逐渐增强，呈现出明显的时间剂量依赖性；尤其对于SW480细胞，当CCTA浓度达到2g·L-1作用96小时后细胞几乎全部死亡；③随着CCTA的浓度及作用时间的增加，Hela细胞位于S期的细胞明显增多，而SW480细胞位于G0/G1期的细胞明显增多;流式细胞仪检测到随着CCTA作用时间和剂量的增加,Hela细胞及SW480细胞的凋亡率均有增高，当CCTA浓度为1.5g·L-1作用48小时和72小时时，Hela细胞凋亡率分别为14.8％和15.36%；SW480细胞的凋亡率分别为34.33%和41.46%。
　　结论：
　　1、在本实验条件下，CCTA对小鼠正常成纤维细胞3T3无细胞毒作用；
　　2、CCTA对人宫颈癌细胞Hela及人结肠癌细胞SW480表现出明显的抑制作用，且呈时间和剂量依赖性；而对人前列腺癌细胞PC3则抑制不明显；
　　3、CCTA通过调控细胞周期和诱导细胞凋亡来实现对Hela细胞及SW480细胞的抑制作用。

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前言

第一部分 初步筛选对 CCTA敏感的肿瘤细胞株

材料和方法

结果

讨论与小结

第二部分 CCTA抗肿瘤作用机制的初步探索

材料和方法

结果

讨论与小结

结 论

参考文献

附图

文献综述

研究生期间发表的论文

致谢

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