论文说明:英文缩略词
声明
1引言
1.1植物中AsA合成的研究
1.2植物中AsA代谢的研究
1.3植物中AsA的转运
1.4植物AsA合成代谢关键酶研究进展
1.4.1 GDP-甘露糖焦磷酸化酶(GMPase)
1.4.2 L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶(GaILDH)
1.4.3脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)
1.5本研究的目的和意义
2材料和方法
2.1试验材料
2.1.1植物材料
2.1.2材料处理
2.1.3菌株与质粒
2.1.4酶及生化试剂
2.1.5 PCR引物
2.2实验方法
2.2.1利用TRIZOL试剂盒提取RNA
2.2.2反转录cDNA第一条链的合成
2.2.3目的基因的分离
2.2.4GalLDH基因反义表达载体的构建
2.2.5农杆菌介导转化烟草
2.2.6转基因烟草植株的PCR检测
2.2.7荧光定量PCR(Real-time quantitative RT-PCR)
2.2.8 AsA含量的测定
3结果与分析
3.1 GalLDH的分离及其特征
3.1.1 GalLDH中间片段的分离
3.1.2 GalLDH基因序列分析
3.2表达载体的构建
3.3基因表达特性分析
3.3.1 GalLDH基因在野生型马铃薯中的表达
3.3.2温度胁迫对光照和黑暗下马铃薯叶片GalLDH基因的转录水平、GalLDH活性和抗坏血酸含量的影响
3.4转反义GalLDH基因烟草的检测
4讨论
4.1马铃薯不同器官GalLDH基因表达
4.2温度对GalLDH基因表达的影响
4.3温度对GalLDH基因表达的影响
5结论
参考文献
致谢