声明
符号说明
摘要
1 前言
1.1 休眠概述
1.1.1 休眠的定义
1.1.2 休眠的界定
1.1.3 休眠的分类
1.1.4 休眠与细胞分裂
1.1.5 类休眠
1.1.6 内休眠
1.1.7 生态休眠
1.2 组蛋白
1.2.1 组蛋白共价修饰
1.2.2 组蛋白变体
1.3 休眠与表观遗传
1.4 本研究的目的及意义
2 实验材料与方法
2.1 实验材料与处理
2.1.1 植物材料
2.1.2 实验处理
2.1.3 菌株和载体
2.1.4 生化试剂
2.1.5 引物
2.2 试验方法
2.2.1 RNA提取
2.2.2 基因组DNA去除
2.2.3 cDNA第一条链的合成
2.2.4 cDNA全长序列的获得
2.2.5 PpH3.3全长基因组序列的获得
2.2.6 启动子的分离
2.2.7 电泳目的片段的回收
2.2.8 DNA片段与克隆载体的连接
2.2.9 大肠杆菌感受态细胞制备
2.2.10 大肠杆菌感受态细胞的转化
2.2.11 试剂盒质粒微量提取方案
2.2.12 定量分析
2.2.13 植物表达载体的构建与转化
2.2.14 PpH3.3启动子表达载体的构建
2.2.15 GUS组织化学染色
3 结果与分析
3.1 PpH3.3的分离
3.1.1 RNA的提取及反转录
3.1.2 PpH3.3 3’片段的分离
3.1.3 PpH3.3 5’片段的分离
3.1.4 PpH3.3全长cDNA的分离
3.2 PpH3.3的序列分析
3.2.1 PpH3.3的全长cDNA分析
3.2.2 PpH3.3编码的蛋白质序列分析
3.2.3 PpH3.3进化树分析
3.3 PpH3.3基因组序列分析
3.4 PpH3.3启动子序列分析
3.5 PpH3.3基因的表达特性分析
3.5.1自然休眠进程中PpH3.3的表达变化
3.5.2 高温和单氰胺对PpH3.3表达的影响
3.6 转拟南芥表达载体的构建
3.7 GUS染色
3.8 转杨树84K正义表达载体的构建
3.9 转基因再生植株的获得
3.10 转基因植株的PCR鉴定
3.11 下一步的计划
讨论
结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
山东农业大学;