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复合益生菌对小鼠和家兔生长性能以及肠道调理作用的影响

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符号说明

1 引言

1.1 复合益生菌的研究进展

1.1.1复合益生菌的类型

1.1.2 复合益生菌的发酵工艺

1.1.3 新型复合益生菌的产品

1.1.4复合益生菌的应用

1.1.5复合益生菌存在的问题及前景

1.2 寡聚糖概述

1.2.1低聚木糖及其理化性质

1.2.2低聚木糖的生物学特性

1.2.3低聚木糖的作用机理

1.2.4低聚木糖的国内外研究进展

1.3多糖的概况与生物活性

1.3.1多糖的概况

1.3.2多糖的生物学活性

1.3.3植物多糖的现状及展望

1.3.4松花粉多糖

1.4 研究的目的和意义

2. 材料与方法

2.1试验材料

2.1.1 菌(毒)株与试验动物

2.1.2试剂和仪器

2.1.3培养基及试剂的配制

2.1.4菌株复苏与纯培养

2.2 植物乳杆菌体外益生效果评价

2.2.4低聚木糖、泰山松花粉多糖与植物乳杆菌培养物抗人工胃肠液的耐受性

2.2.5低聚木糖、泰山松花粉多糖与植物乳杆菌培养物的抗病原菌特性

2.2.6复合益生菌的制备

2.3 复合益生菌对动物的生长性能以及肠道调理作用

2.3.2. 复合益生菌对小鼠肠道的调理作用

2.3.3复合益生菌对家兔生长性能的影响

2.3.4复合益生菌对家兔肠道的调理作用

2.3.5数据分析

3 结果

3.1 植物乳杆菌体外益生效果评价

3.1.1低聚木糖和泰山松花粉多糖含量对菌液生长曲线的影响

3.1.2低聚木糖和泰山松花粉多糖含量对菌液pH值变化的影响

3.1.3低聚木糖和泰山松花粉多糖含量对植物乳杆菌的增殖作用

3.1.4低聚木糖、泰山松花粉多糖与植物乳杆菌培养物的耐酸和耐胆盐特性

3.1.5低聚木糖、泰山松花粉多糖与植物乳杆菌培养物抗人工胃肠液的耐受性

3.1.6低聚木糖、泰山松花粉多糖与植物乳杆菌培养物的抗病原菌特性

3.2 复合益生菌对小鼠的生长性能以及肠道调理作用

3.2.1复合益生菌对小鼠的生长性能

3.2.2复合益生菌对小鼠肠道调理作用

3.3 复合益生菌对家兔生长性能、免疫性能及肠道调理作用

3.3.1复合益生菌对家兔生长性能的影响

3.3.2复合益生菌对家兔免疫性能的影响

3.3.3复合益生菌对家兔生长性能及肠道的调理作用

4 讨论

5结论

参考文献

致谢

个人简介

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摘要

在生产中使用的复合益生菌大多是外源性的活菌制剂,随后的研究发现低聚糖能够选择性提高动物肠道内固有益生菌群的增殖,与活菌制剂产生的益生效果相似。功能性低聚糖在动物胃肠道内不能直接消化利用,但却能被肠道的益生菌利用,同时具有抑制有害菌的生长,因而对动物胃肠道微生物区系、免疫功能等有重要影响。植物多糖饱含丰富的营养成分和活性物质,具有抗菌、抗病毒、抗氧化、提高动物机体免疫机能等功能,对机体健康大有裨益。近年来,中国畜牧业发展取得了举世瞩目的成就,但随之而来的药物残留等问题也严重影响着畜产品的消费以及出口,研发混和益生菌添加剂成为近几年畜禽业研究的方向之一。
  鉴于前人相关的研究,本课题通过低聚木糖和泰山松花粉多糖对植物乳杆菌体外增殖研究发现在植物乳杆菌菌液中添加20mg/mL的低聚木糖和50mg/mL的泰山松花粉多糖后菌落数显著上升;添加20mg/mL低聚木糖和50mg/mL泰山松花粉多糖后在pH=5以上的培养基中植物乳杆菌生长良好,活菌数较其他添加量组高;植物乳杆菌在人工模拟胃液中培养1h活菌数基本不受影响,培养3h后活菌数大约降低10%;在人工模拟肠液中培养3h活菌数不变。结果表明,植物乳杆菌具备益生菌特性,在菌液中添加20mg/mL低聚木糖和50mg/mL泰山松花粉多糖后益生效果更佳明显,可进一步研究其在动物营养和日粮中的应用效果。
  选取体重25g左右SPF昆明小鼠75只,随机分为5组。Ⅰ组(低聚木糖+泰山松花粉多糖+植物乳杆菌)、Ⅱ组(低聚木糖+植物乳杆菌)、Ⅲ组(泰山松花粉多糖+植物乳杆菌)IV组(沙门氏菌+金黄色葡萄球菌)和Ⅴ组(去离子水)。每组小鼠每天分别灌胃1mL。试验期为期28d,在第7、14、21和28d每组随机选取3只小鼠进行空腹称重,剖杀小鼠后采集盲肠并称重,采集小肠组织分析其肠绒毛发育状况。结果显示Ⅰ组和Ⅱ组显著高Ⅲ组、Ⅳ组与Ⅴ组(P<0.05),Ⅰ组和Ⅱ组之间差异不显著(P>0.05),其中Ⅰ组小鼠的生长性能最好。在肠道形态学指标中,复合益生菌能显著提高小鼠十二指肠的绒毛长度。
  选取体重约1.2kg家兔75只,随机分为5组。I组(XOS+TPPPS+LP)、II组(XOS+LP)、III组(TPPPS+LP)、IV组(SA+SP)、Ⅴ组(PBS)。试验为期35d,在第0、7、14、21、28和35d对每组每只家兔进行空腹称重,计算每个阶段的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI),并计算饲料转化率(F/G);在7、14、21、28和35d每组随机选取3只家兔采血检测血清中总蛋白和胆固醇含量,剖杀后采集家兔肝脏和脾脏测定免疫器官指数,无菌采集盲肠内容物检测其乳酸杆菌和大肠杆菌的活菌数,采集十二指肠组织观察其形态并分析肠绒毛的发育状况。结果显示I组(XOS+TPPPS+LP)家兔的以上指标均有显著提高,其中在整个试验期Ⅰ组家兔的免疫器官指数和十二指肠形态学结果显著高于其他组(P<0.05),在生化性能的测定中I组家兔的指标显著高于对照组(P<0.05)。本研究表明,复合益生菌可以提高家兔的日增重和料肉比,提高机体的免疫力,有利于肠道益生菌的存活和繁殖,促进小肠绒毛的发育以及改善肠道内环境的稳态。

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