杨树菇液体发酵及其抗生物质的初步研究

摘要

通过对14株食用真菌的抑菌试验筛选,发现杨树菇(Agrocybe aegerita)具有极强的抑菌作用,且抑菌谱广,可以有效抑制细菌、酵母和部分霉菌的生长.与不同浓度(0.05﹪、0.1﹪、0.2﹪、0.3﹪g/ml)山梨酸、苯甲酸抑菌能力相比,抑菌效果更为明显.同时,对杨树菇的菌丝进行了液体培养,结果发现其菌丝体生长良好,菌丝球致密、均匀,说明其易于液体培养.并发现去除菌丝体的发酵液具有较好的抗菌活性,可有效地抑制格兰氏阳性(G<'+>)、格兰氏阴性(G<'->)菌,对酵母及霉菌的抗性较差.用70﹪的乙醇浸提菌丝体,浓缩去除已醇后的提取液也具有一定的抗菌活性.采用40﹪-80﹪的硫酸铵分级沉淀,0.01M的磷酸缓冲溶解,超滤除去硫酸铵,经检测超滤膜截留部分具有良好的抗菌活性.可以抑制金黄色葡萄球菌(G<'+>)和大肠杆菌(G<'->)的生长,但对酵母菌和霉菌不起作用.经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析,得到一个阶段洗脱峰和一个主要的直线梯度洗脱峰,此梯度洗脱峰具有抗菌活性.后经SDS聚丙烯酰铵凝胶电泳检测为三条分子量十分接近的多肽链.研究发现,此粗提物在20-70℃的范围内比较稳定,最适作用pH为5.0,在pH3-6的条件下其抗菌活性高且比较稳定.某些金属离子特别是Zn<'2+>对其抗菌活性有很强的激活作用,Pb<'2+>则有强烈的抑制作用.

目录

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摘要

Abstract

第一章前言

第二章抗菌活性强抗菌谱广的食用真菌菌株的筛选

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1初筛的结果

2.2复筛的结果

2.3与不同浓度山梨酸抗菌活力的比较

2.4与不同浓度苯甲酸抗菌活力的比较

3讨论

第三章杨树菇的液体培养及其抗菌活性测定

1材料和方法

1.1菌种

1.2培养基

1.3培养方法

1.4发酵液酸性测定

1.5发酵后的抗菌活性测定

1.6主要仪器

2结果

2.1发酵液的pH值

2.2发酵液及其菌丝体提取液的抗菌活性

3 讨论

第四章杨树菇摇瓶培养中培养基的筛选及培养条件的优化

1材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1不同碳源对杨树菇发酵液抗菌活性的影响

2.2不同氮源对杨树菇发酵液抗菌活性的影响

2.3培养基的优化

2.4最适发酵条件的优化

2.5热稳定性的测定

3 讨论

第五章抗菌活性物质的初步分离及性质

1材料与方法

1.1菌种

1.2培养基

1.3缓冲液

1.4主要试剂与仪器

1.5杨树菇抗菌活性物质的分离纯化

1.6抗菌活性物质的性质

2.结果和分析

2.1粗提取液A的抗菌活性测定

2.2抗菌活性物质的分离纯化

2.3抗菌活性物质的性质

3讨论

参考文献

致谢

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