蝙蝠蛾拟青霉Cs-4对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用

摘要

目的：
　　 本研究通过建立阿霉素肾病大鼠实验动物模型，观察应用蝙蝠蛾拟青霉Cs-4(Paecilomyces hepiali)治疗大鼠模型肾脏组织病理学改变、肾小球细胞外基质成分含量的变化，以及肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-I）、纤溶酶原激活物抑制物l（PAI-1）及骨调素(OPN)mRNA含量变化与肾脏纤维化之间的关系，揭示蝙蝠蛾拟青霉Cs-4防治肾脏纤维化的机制，为临床应用提供理论依据。
　　 方法：
　　 雄性SD大鼠40只，随机分为正常组（N组）、模型组（M组）、蝙蝠蛾拟青霉Cs-4（J组）、贝那普利组（B组）4组，每组10只，采用左侧肾脏切除加尾静脉重复注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型。术后1周蝙蝠蛾拟青霉Cs-4组给予蝙蝠蛾拟青霉Cs-4500mg/kg/d灌胃，贝那普利组给予贝那普利4 mg/kg/d灌胃，同时对照组和模型组给予等量自来水灌胃。用药8周后观察各组大鼠24h尿蛋白定量、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血浆总蛋白(TP)、血白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(scr)的水平；取肾组织于光镜、电镜下观察肾脏病理变化，应用免疫组化方法测定肾组织OPN、纤维粘连蛋白(FN)、胶原IV(COL-IV)的表达，实时荧光定量PCR测定肾组织中TGF-β1、TIMP-1、PAI-1及OPNmRNA的表达。
　　 结果：
　　 (1)M组与N组相比血TP、ALB明显降低(P<0.01)，血CHO、TG、BUN、Scr及24h尿蛋白定量均明显升高(P<0.01)；治疗(B、J)组与M组相比血浆蛋白能明显升高，血脂降低，肾功能改善，尿蛋白减少。
　　 (2)肾组织病理显示：
　　 光镜下N组肾小球结构清晰：M组肾脏间质炎性细胞增多，可见纤维化及蛋白管型，系膜细胞增生和上皮细胞出现空泡变性，系膜基质增多，可见部分局灶节段性硬化改变；治疗组（B、J组）系膜细胞轻度增生，病变明显轻于M组。
　　 电镜下N组肾小球结构正常；M组观察到肾小球代偿性肥大，系膜细胞增生，肾小球脏层上皮细胞足突部分融合，基底膜部分增厚，厚薄不一，结构疏松；治疗组（B、J组）明显轻于M组。
　　 (3)肾组织免疫组化：M组中OPN、CoI-Ⅳ、FN的表达较N组明显增强(P<0.01)；治疗组（B、J组）较M组明显改善。说明蝙蝠蛾拟青霉Cs-4可以下调阿霉素肾病大鼠的OPN、Col-Ⅳ、FN的表达。
　　 (4) RT-PCR显示治疗组（J组和B组）TGF-B1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的表达较M组降低。
　　 结论：
　　 本实验结果表明，蝙蝠蛾拟青霉Cs-4能够有效地降低阿霉素肾病大鼠尿蛋白，提高血浆蛋白，改善脂质代谢，改善肾功能。蝙蝠蛾拟青霉Cs-4能够抑制OPN、Col-Ⅳ、FN的表达，抑制阿霉素肾病大鼠ECM的合成，减少ECM在肾小球和肾小管中的积聚，促进肾脏病理损害的修复。蝙蝠蛾拟青霉Cs-4通过降低外周血TGF-β1水平，抑制ECM成分的合成；下调大鼠肾组织TIMP-1、PAI-1水平，减少ECM成分的积聚，防止肾脏纤维化的发生。蝙蝠蛾拟青霉Cs-4可以有效地调节细胞外基质，抑制细胞外基质的积聚，保护肾单位，对慢性肾脏纤维化具有明显的防治效果。

目录

文摘

英文文摘

CONTENTS

符号说明

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附表、附图

参考文献

综述 肾脏纤维化的发生机制及治疗

综述参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文

学位论文评阅及答辩情况表