HMGB1对体外人肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

摘要

目的:观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对体外人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖、迁移和凋亡的影响。
　　 方法:体外培养人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)至5～8代,然后开始实验。配制含不同浓度HMGB1(0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml和1000ng/ml)的培养液,体外分别培养24小时和48小时后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的HMGB1对HPASMC细胞生长增殖率的影响。利用Boydend小室法检测穿膜细胞数,观察含不同浓度HMGB1的无血清培养基对HPASMC体外培养20小时的趋化作用。用TUNEL法检测不同浓度HMGB1对HPASMC作用48小时后细胞凋亡情况的影响。
　　 结果:(1)MTT法检测显示HMGB1对HPASMC细胞作用24小时或48小时后,与阴性对照组相比,实验组细胞增殖率明显升高,随着HMGB1浓度增加,细胞增殖率升高(P＜0.01),并在HMGB1浓度为100ng/ml时达到平台,且经HMGB1处理48小时后细胞增殖率高于24小时对应浓度组(P＜0.05)。(2)Boyden小室法趋化实验显示随着HMGB1浓度升高,穿膜细胞数增加(P＜0.01),且HMGB1浓度为100ng/ml时趋化作用达到峰值,HMGB1浓度为1μg/ml时趋化作用略减弱。(3)TUNEL法检测细胞凋亡结果显示,不同浓度HMGB1(0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml和1000ng/m1)干预48小时后,对照组和各实验组的细胞凋亡率分别为8.56％,8.22％,7.61％,7.50％和7.11％(P＞0.05)。
　　 结论:1.HMGB1具有促进HPASMC进行细胞增殖和迁移的作用,且该作用对HMGB1具有浓度依赖性,在HMGBI浓度为100ng/ml时达到峰值。2.HMGB1对HPASMC的细胞凋亡无明显影响。3.HMGB1通过诱导HPASMC增殖和迁移来促进肺血管重构。