硼替佐米调控泛素蛋白酶体系统在高肺血流性肺动脉高压中的机制研究

摘要

背景:
　　 与目的肺动脉高压(pulmonaryarterialhypertension,PAH)是小儿先天性心脏病的常见并发症之一，以持续增高的肺动脉压并最终导致右心衰为特点的难治性疾病。肺动脉血管内皮损伤、平滑肌细胞过度增殖导致的肺血管重构是肺动脉高压形成的基本病理特征。多数研究认为肺血流增加，血管内皮细胞损伤，平滑肌细胞表型改变、过度增殖、凋亡减少，肺血管床重构和管腔变窄，导致肺动脉高压。肺动脉高压的发病机制涉及多种复杂的细胞因子及其调控网络，其具体发病机制尚不清楚。因此，进一步明确肺动脉高压发病机制，为肺动脉高压提供更有效的治疗方法具有重要意义。
　　 本研究的目的:
　　 是观察在肺动脉高压发生发展过程中泛素蛋白酶体系统的激活情况及硼替佐米对大鼠高血流性肺动脉高压形成的抑制作用，并探讨泛素-蛋白酶体系统及增殖细胞核抗原(PCNA)/Caspase-3在硼替佐米抑制肺动脉高压形成中可能的作用机制。
　　 方法:
　　 45只Wistar大鼠随机分为对照组、分流组、硼替佐米干预组，每组15只。各组于术后第8周测量右心室平均收缩压(RVSP)、右心室肥厚指数(RVHI)，HE染色观察肺小动脉形态学改变，计算WT％及WA％。采用免疫组化法、WesternBlot法检测肺组织中Ub、PCNA、Caspase-3的蛋白表达，WesternBlot法检测各组大鼠肺组织中NF-κB的活化情况。
　　 结果:
　　 与对照组相比，分流组大鼠肺动脉管壁显著增厚、官腔狭窄，RVSP、RVHI及WT％、WA％增高（P均＜0.01），Ub、PCNA、Caspase-3蛋白表达增强(P＜0.05），NF-κB活性增强。与分流组相比，应用硼替佐米干预8周后大鼠肺动脉管壁增厚及管腔狭窄程度明显减轻，RVSP、RVHI及WT％、WA％降低(P＜0.01），Ub、PCNA蛋白表达减弱(P＜0.05)，Caspase-3蛋白表达增强（P＜0.05），NF-κB活性受抑制。
　　 结论:
　　 高肺血流性肺动脉高压可激活体内泛素-蛋白酶体系统。硼替佐米可能通过影响NF-κB信号通道来调节肺动脉平滑肌中PCNA/Caspase-3表达而起到抑制高肺血流性肺动脉高压形成的作用。

目录

声明

摘要

英文缩写及符号说明

前言

材料和方法

1、实验材料

2．实验方法

3．统计学处理

结果

1．实验动物存活情况与分流通畅情况

2．血流动力学改变

3．肺组织及心脏形态学变化

4．肺组织中Ub表达变化

5．肺组织中NF-κB活性变化

6．肺组织中PCNA、Caspase-3表达的变化

讨论

一、PAH发病的解剖基础

二、PAH模型构建

三、泛素蛋白酶体系统与PAH

四、PM中NF-κB通路被激活

五、硼替佐米可诱导细胞凋亡

结论

附图表

参考文献

致谢

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