声明
摘要
缩略符号说明
第一章绪论
1.1纤维素酶的分类及协同作用机制
1.2纤维素酶的糖基化
1.3纤维素酶糖基化的功能
1.3.2 TrCBH Ⅰ的O-糖基化的作用
1.4糖肽富集方法简介
1.5糖基化的鉴定方法
1.6课题意义及立题依据
第二章TrCBH Ⅰ的制备
2.1实验材料与实验试剂的配制
2.1.2实验所用的培养基及溶液的配方
2.1.3实验所用的仪器和材料
2.2实验方法
2.2.2 TrCBH Ⅰ的分离纯化
2.2.3 SDS-PAGE检测
2.2.4染色
2.2.5脱色
2.3结果和讨论
2.3.1六种粗酶液中蛋白的定性检测
2.3.2六种条件下TrCBH Ⅰ的纯化结果
2.4本章小结
第三章TrCBH Ⅰ的质谱分析与糖基化形式
3.1实验所用材料和试剂
3.1.1实验所用的溶液及试剂
3.1.2常用的仪器和材料
3.2实验方法
3.2.1溶液内消化
3.2.2胶内消化
3.2.3用ZIC-HILIC色谱柱分离糖肽
3.2.4糖肽的浓缩冻干
3.2.5质谱分析流程
3.3结果和讨论
3.3.1 T.reesei RutC-30在乳糖诱导下TrCBH Ⅰ的糖基化修饰情况
3.3.2 T.reesei RutC-30在纤维二糖诱导下TrCBH Ⅰ的糖基化修饰情况
3.3.3 T.reesei RutC-30在丰富培养基诱导下TrCBH Ⅰ的糖基化修饰情况
3.3.4 T.reesei QM9414在乳糖诱导下TrCBH Ⅰ的糖基化修饰情况
3.3.5 T.reesei QM9414在纤维二糖诱导下TrCBH Ⅰ的糖基化修饰情况
3.3.6 T.reesei QM9414在丰富培养基诱导下TrCBH Ⅰ的糖基化修饰情况
3.4本章小结
第四章基于TrCBHⅠ糖基化位点的三维结构分析
4.1.2“Cartoon”形式的蛋白质三维结构图的制作
4.2分析和讨论
4.2.2CBM结构域糖基化位点的三维结构分析
4.3本章小结
全文总结与展望
附录
参考文献
致谢
硕士期间发表的论文