声明
摘要
符号说明
1引言
2黄酮类化合物
2．1黄酮类化合物的结构和分类
2．2黄酮类化合物的功能
2．3黄酮类化合物的生物合成途径
3查尔酮合酶
3．1查尔酮合酶的定义和功能
3．2查尔酮合酶的反应机理
4查尔酮异构酶
4．1查尔酮异构酶的分类与功能
4．2查尔酮异构酶的催化机制
5立题依据与研究内容
第二章蕨类植物中Ⅰ／Ⅱ型查尔酮异构酶的克隆与功能鉴定
1前言
2实验材料及仪器
2．1植物材料
2．2菌种和质粒
2．3实验主要试剂
2．4实验仪器
2．5主要溶液及培养基
2．6 PCR引物序列
3实验方法
3．1基因序列分析
3．2蕨类植物总RNA的提取以及cDNA合成
3．3基因克隆
3．4蛋白表达载体的构建
3．5 AcCHI1基因定点突变
3．6蕨类植物查尔酮异构酶蛋白表达和纯化
3．7酶活功能鉴定
3．8基因体内功能研究
4实验结果
4．1 CHI进化分析
4．2序列比对
4．3 CHI序列分析与克隆
4．4原核表达载体构建和蛋白纯化
4．5体外酶活鉴定
4．6序列比对和蛋白同源模拟
4．7突变体原核表达载体构建及蛋白纯化
4．8 AcCHI1突变体的体外酶活鉴定
4．9 LoCHI1和AcCHI1在拟南芥体内的过表达分析
5总结
第三章蕨类植物Ⅳ型查尔酮异构酶与查尔酮合酶的相互作用研究
1前言
2实验材料及仪器
2．1植物材料
2．2菌株和载体
2．3主要试剂
2．4主要培养基或溶液
2．5 PCR引物
3实验方法
3．1序列分析
3．2引物设计
3．3基因克隆及原核表达载体的构建
3．4蛋白表达
3．6基因植物体内功能研究
3．7 Ⅳ型CHI与CHSs相互作用研究
4实验结果
4．1基因序列分析
4．2原核表达载体构建和蛋白纯化
4．3 CHILs蛋白活性检测
4．4 LoCHIL和AcCHIL在植物体内过表达分析
4．5 Ⅳ型CHI与CHSs相互作用研究
5总结
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
附录
学位论文评阅及答辩情况表
山东大学;
