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极谱分析法在涎磷蛋白和氧化石墨烯电化学检测中的应用

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目录

摘要

第一章 绪论

1.1 电化学酶联免疫分析

1.1.1 伏安酶联免疫分析法

1.1.2 安培酶联免疫分析法

1.1.3 电化学酶免疫传感器

1.2 过氧化物酶及其底物体系

1.2.1 过氧化物酶

1.2.2 辣根过氧化物酶催化原理

1.2.3 过氧化物酶催化的常见底物

1.3 伏安酶联免疫分析法在临床上的应用

1.3.1 乙型肝炎病毒抗原抗体的测定

1.3.2 人血清铁蛋白的测定

1.3.3 人血清甲胎蛋白的测定

1.3.4 人血清甲状腺的测定

1.3.5 人血清IgG和IgE的测定

1.3.6 人血清类风湿因子抗体的测定

1.4 牙本质涎磷蛋白的研究意义及现有检测方法

1.4.1 研究意义

1.4.2 牙本质涎磷蛋白检测方法的研究进展

1.5 氧化石墨烯

1.5.1 氧化石墨的发展历史

1.5.2 氧化石墨烯的合成

1.5.3 羧基功能化的氧化石墨烯的研究

1.6 本论文的基本思路和目的

参考文献

第二章 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺-H2O2-HRP电化学酶联免疫分析体系测定人牙本质涎磷蛋白的研究

2.1 实验部分

2.1.1 仪器

2.1.2 材料

2.1.3 实验方法

2.2 结果和讨论

2.2.1 TMB-H2O2-HRP催化体系的线性扫描二阶导数极谱曲线

2.2.2 HRP酶催化产物的电化学行为

2.2.3 偶合反应条件

2.2.4 测定条件

2.2.5 测定HRP的工作曲线

2.2.6 电化学ELISA检测DSPP

2.3 本章小结

参考文献

第三章 邻联甲苯胺-H2O2-HRP电化学酶联免疫分析体系测定人牙本质涎磷蛋白的研究

3.1 实验部分

3.1.1 仪器

3.1.2 材料

3.1.3 实验方法

3.2 结果和讨论

3.2.1 OT-H2O2-HRP催化体系的线性扫描二阶导数极谱曲线

3.2.2 HRP酶催化产物的电化学行为

3.2.3 偶合反应条件

3.2.4 测定条件

3.2.5 测定HRP的工作曲线

3.2.6 电化学ELISA检测DSPP

3.3 本章小结

参考文献

第四章 一种检测微量人牙本质涎磷蛋白的电化学酶联免疫分析新方法的研究

4.1 实验部分

4.1.1 仪器

4.1.2 材料

4.1.3 实验方法

4.2 结果和讨论

4.2.1.线性扫描二阶导数极谱曲线

4.2.2 偶合反应条件的优化

4.2.3 测定条件的选择

4.2.4 测定HRP的工作曲线、精密度和检测限

4.2.5 DSPP的电化学检测

4.3 本章小结

参考文献

第五章 邻联茴香胺-H2O2-HRP电化学酶联免疫分析体系测定人牙本质涎磷蛋白的研究

5.1 实验部分

5.1.1 仪器

5.1.2 材料

5.1.3 实验方法

5.2 结果和讨论

5.2.1 ODA-H2O2-HRP催化体系的线性扫描二阶导数极谱曲线

5.2.2 HRP酶催化产物的电化学行为

5.2.3 偶合反应条件

5.2.4 测定条件的选择

5.2.5 测定HRP的工作曲线

5.2.6 电化学ELISA检测DSPP

5.3 本章小结

参考文献

第六章 羧基功能化氧化石墨烯作为模拟酶催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺电化学测定H2O2的研究

6.1 实验部分

6.1.1 仪器

6.1.2 材料

6.1.3 氧化石墨烯的制备

6.1.4 石墨烯的羧基化

6.1.3 电化学检测

6.2 结果和讨论

6.2.1 羧基功能化氧化石墨烯的表征

6.2.2 催化反应的光谱和电化学研究

6.2.3 条件优化

6.2.4 定量测定H2O2

6.2.5 新鲜牛奶中H2O2的测定

6.3 本章小结

参考文献

结论

致谢

攻读学位期间已发表和待发表的相关学术论文题录

声明

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摘要

本文描述了以辣根过氧化物酶(HRP)为标记酶的一种高灵敏的电化学酶联免疫分析法测定人牙本质涎磷蛋白(DSPP)的新方法。分别以3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)、邻联甲苯胺(OT)、邻苯二胺(OPD)、邻联茴香胺(ODA)作为酶催化反应的底物,用线性扫描二阶导数极谱法检测酶催化产物,在滴汞电极上产生一个灵敏的线性扫描二阶导数极谱还原峰,将该方法与生物素的双抗体夹心ELISA法相偶联,应用于DSPP的检测。牙本质涎磷蛋白(DSPP)是正畸牙根吸收程度的重要标志物。本论文构建了一种检测微量人牙本质涎磷蛋白的电化学酶联免疫分析新方法。
  羧基氧化石墨烯(GO-COOH)具有模拟酶的性质,在双氧水存在下能催化氧化底物3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB),从而得到了蓝色的产物,线性扫描二阶导数极谱法检测酶催化产物,产物有一个灵敏的还原峰。羧基氧化石墨烯(GO-COOH)对3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB)的催化能力要高于生物酶辣根过氧化物酶(HRP),羧基氧化石墨烯(GO-COOH)像辣根过氧化物酶(HRP)一样催化过程属于乒乓机制。将该方法应用测定鲜牛奶中H2O2的含量,得到了满意的结果。

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