局部移植人脂肪干细胞对带真皮下血管网皮片移植成活影响的实验研究

摘要

目的:探讨人脂肪间充质干细胞(ADSCs)对带真皮下血管网皮片移植成活的影响。
　　 方法:培养增殖人ADSCs，流式细胞术鉴定表面标记物，5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)标记ADSCs，于大鼠背部设计术区，实验组(n=10)局部注射EdU标记ADSCs PBS悬浮液，对照组(n=10)局部注射PBS。术后7d处死大鼠，对比两组移植皮片的成活率，移植皮片组织HE染色，光镜下观察组织坏死、微血管数目及炎症细胞浸润，血管内皮系细胞特异性标志物CD31及血管内皮生长因子(VEGF)免疫组织化学染色检测，计算微血管密度，对比两组VEGF表达密度，EdU标记检测ADSCs在移植皮片内的分布及分化。
　　 结果:术后7d实验组大鼠移植皮片成活率为(95.51±5.79)％，高于对照组(70.04±10.79)％(P＜0.05)。实验组皮片单位面积(每视野(×200))内微血管数目为(10.55±4.43)个，高于对照组的(5.85±3.13)个(P＜0.05)。实验组VEGF的表达密度为130.31±8.71，高于对照组的54.22±13.82(P＜0.05)。实验组EdU阳性细胞分化为部分小血管内皮细胞，对照组检测不到EdU阳性细胞分布。
　　 结论:局部移植的ADSCs可以在组织内分化成血管内皮细胞，并促进VEGF等生长因子的分泌，从而促进大鼠带真皮下血管网皮片移植成活。

目录

摘要

引言

第1章 实验材料与方法

1．1 实验材料

1．1．1 脂肪干细胞与实验动物

1．1．2 主要仪器及设备

1．1．3 实验试剂及材料

1．1．4 实验试剂配备

1．2 实验方法

1．2．1 脂肪干细胞的培养及传代

1．2．2 脂肪干细胞的流式鉴定

1．2．3 EdU标记脂肪干细胞

1．2．4 EdU标记脂肪干细胞结果检测

1．2．5 大鼠背部带真皮下血管网皮片移植模型建立与脂肪干细胞移植

1．2．6 移植皮片观察与皮片成活率的计算

1．2．7 HE染色观察

1．2．8 免疫组化检测血管内皮系细胞特异性标志物CD31

1．2．9 免疫组化检测血管内皮生长因子VEGF

1．2．10 荧光染色检测EdU阳性细胞在组织内分布

1．2．11 统计分析

第2章 结果

2．1 ADSCs的体外培养形态观察

2．2 ADSCs表面标志物的流式鉴定结果

2．3 EdU体外标记干细胞结果检测

2．4 移植皮片的大体观察

2．5 移植皮片成活率

2．6 HE染色结果

2．7 CD31免疫组化染色结果

2．8 VEGF免疫组化染色结果

2．9 EdU标记组织内检测结果

第3章 讨论

结论

参考文献

综述

攻读学位期间的研究成果

致谢

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