叶黄素补充对人体DNA损伤及抗氧化功能影响的研究

摘要

目的：近年来对膳食活性成分的抗氧化功效已有很多研究，叶黄素作为一种天然生物活性成分也得到了更多关注，但其补充对健康人体的抗氧化功效尚未完全明确，本文旨在探讨叶黄素补充对人体DNA损伤及抗氧化功能的影响。
　　方法：招募20名健康志愿者（年龄20～30岁），将其随机分为2组，即空白对照组和叶黄素补充干预组。叶黄素组连续3周口服补充叶黄素胶囊（20mg/d），空白对照组不给予任何营养补充剂。所有志愿者在试验期间避免摄入叶黄素含量丰富的食物，日常作息规律。于首次口服叶黄素前及末次服用24h后分别留取两组研究对象清晨空腹静脉血7mL。高效液相色谱法检测血浆中叶黄素含量，彗星电泳实验（单细胞凝胶电泳实验）测定外周血淋巴细胞 DNA氧化损伤程度，采用羟胺法检测血浆总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力，二硫代-2-硝基苯甲酸（DTNB法）比色法测定血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性，硫代巴比妥酸法（TBA法）检测血浆丙二醛(MDA)含量，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA法）检测血浆血红素氧合酶-1（HO-1）活力、氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）浓度，采用红细胞膜荧光标记法(DPH法)测定红细胞膜流动性，定磷法测定红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性，CCK-8法检测外周血淋巴细胞增殖活性。
　　结果：补充叶黄素3周后，受试者血浆中叶黄素水平达1.112μg/mL，较补充干预前升高了228％（P<0.01）。DNA损伤分析显示，叶黄素组5μmol/L H2O2、10μmol/L H2O2诱导的外周血淋巴细胞DNA损伤水平分别为92.48AU、134.31AU，均显著低于空白对照组（P<0.05）；自发性DNA损伤、25μmol/L H2O2诱导的DNA损伤与空白对照组相比无显著差异。经Pearson相关分析，干预后叶黄素组血浆中叶黄素浓度与自发性DNA损伤、10μmol/L H2O2诱导的DNA氧化损伤呈负相关（分别为r=-0.795,P=0.018;r=-0.693,P=0.043）。补充叶黄素3周后叶黄素组血浆中MDA含量为3.5nmol/mL，与补充前及空白对照组相比显著降低（P<0.05）；血浆GSH-Px活力为117.4U/mL，与补充前及空白对照组相比显著升高（P<0.05）；血浆T-SOD、HO-1活性及Ox-LDL含量均无显著改变（P＞0.05）。干预后叶黄素组红细胞膜流动性偏振度ρ和微粘度η分别为0.123、0.762，均显著低于干预前水平，红细胞膜流动性升高（P<0.05）；红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性为3.232U/mL，较补充前及空白对照组均显著升高（P<0.01）。补充叶黄素后外周血淋巴细胞增殖活性与空白对照组相比无显著差异（P＞0.05）。
　　结论：叶黄素补充对健康人体DNA氧化损伤有保护作用，可增强人体抗氧化功能。

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引言

第一章 叶黄素补充对人体DNA氧化损伤的影响

1.研究对象与方法

1.1研究对象与试验流程

1.2仪器及材料

1.3试验方法

1.4 统计学方法

2结果

2.1研究对象基本情况

2.2血浆叶黄素水平含量：

2.3叶黄素干预对外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

2.4血浆叶黄素浓度与DNA氧化损伤相关性分析

3讨论

第二章 叶黄素补充对人体抗氧化功能的影响研究

1研究对象与方法

1.1研究对象与试验流程

1.2仪器与材料

1.3试验方法

1.4 统计学方法

2结果

2.1叶黄素干预对血浆抗氧化酶活性的影响

2.2叶黄素干预对血浆HO-1、Ox-LDL水平的影响

2.3叶黄素干预对红细胞膜流动性的影响

2.4叶黄素干预对红细胞膜Na+-K+-ATP酶活力的影响

2.5叶黄素补充对外周血淋巴细胞增值活性的影响

3讨论

结论

参考文献

综述:叶黄素与氧化应激及相关疾病的研究进展

中英文缩略词对照表

附录

攻读学位期间的研究成果

致谢

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