灵武长枣中多糖的提取分离技术研究

摘要

枣（Zizipihus Jujube Mlill）为鼠李科枣属植物，是我国传统医药中“药食同源”的优良补品，具有镇静、安神、补血、健脑、抗癌、增强免疫力等功效。灵武长枣（Lingwu chang jujube）原产于宁夏灵武市，为当地的主要栽培品种，有极高的营养价值和很好的医疗保健作用。我国在枣多糖方面的研究还处在起步阶段，灵武长枣多糖的研究还未见报道。为了明确灵武长枣中多糖类有效成分，探讨其作用机制，以利于今后灵武长枣的合理开发和利用，本论文对灵武长枣中多糖的提取、纯化、分级、分子量测定及初步结构鉴定等方面进行了较为系统的研究。研究结果如下：
　　 （1）采用热水浸提法提取灵武长枣中水溶性多糖，研究了在提取次数都为两次的情况下液料比、浸提时间、浸提温度对长枣多糖得率的影响。在单因素试验基础上，以这三个因素为基础设定五个水平，把粗多糖得率作为响应值，应用中心组合试验建立数学模型，进行响应面分析。结果表明：长枣多糖的最佳水提条件参数为：液料比1:11，在90℃下提取5h，实验验证该条件下长枣多糖得率达到8.02%。通过方差分析证明，响应面分析法建立的数学模型显著性高，较已有的长枣多糖提取工艺法具有成本低，操作简便，试验周期短，能获得较高多糖提取率等优点。
　　 （2）在脱蛋白的过程中，通过前期的试验和综合比较，排除了常用的氯仿-正丁醇（Sevage）法，主要对三氯乙酸（TCA）法进行研究。选取三氯乙酸的浓度、除蛋白的次数、反应时间三个因素进行单因素试验和中心组合试验。由响应面和回归方程分析得出三氯乙酸法除长枣粗多糖中蛋白的最佳工艺条件为三氯乙酸浓度14%，重复除蛋白三次，反应时间为8小时。并且实验证明，蛋白去除率达到96%以上。
　　 （3）用纤维素DEAE-52层析柱对脱蛋白、脱色、脱盐的长枣多糖进行分级。洗脱得到6个组分的多糖样品（Ju-0、Ju-1、Ju-2、Ju-3、Ju-4、Ju-5）。并用琼脂糖Sepharose-4B凝胶柱分别纯化过滤了6个多糖样品。用紫外吸收光谱鉴定其纯度，表明6个多糖样品不含蛋白质和核酸。
　　 （4）采用粘度法结合经验计算公式公式测定6个多糖样品的相对分子质量。结果为长枣多糖Ju-0、 Ju-1、Ju-2、Ju-3、Ju-4、Ju-5的分子量分别为1.24×105、7.61×104、1.02×105、9.50×104、1.33×105、1.60×105。用红外光谱法鉴定6个多糖的初步结构，证明6种多糖样品为β-D-吡喃多糖。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 绪论

第二章 灵武长枣粗多糖水提取工艺研究

第三章 长枣多糖的除蛋白工艺研究

第四章 长枣多糖分级纯化

第五章 粘度法测定多糖相对分子量及初步结构测定

第六章 结论与展望

参考文献

致谢

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