人血浆中两种大环内酯类抗生素的UPLC-MS/MS法测定及药物动力学研究

摘要

目的:建立专属、灵敏的分析方法,测定人血浆中阿奇霉素和克拉霉素的浓度并用于临床药动学研究。
　　 方法:测定人血浆中阿奇霉素浓度时,0.5 mL血浆样品经液液萃取处理后,以乙腈-0.05mol/L乙酸铵水溶液为流动相,采用梯度洗脱在ACQUITY UPLCTM BEH C18柱上进行分离,通过ESI源电离在正离子方式下进行检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z749.7→m/z591.2(阿奇霉素)和m/z837.0→m/z679.2(内标罗红霉素)。测定人血浆中的克拉霉素浓度时,0.2 mL血浆样品经液液萃取处理后,以乙腈-0.05mol/L乙酸胺水溶液为流动相,采用梯度洗脱在ACQUITY UPLCTM BEH C18柱上进行分离,通过ESI源电离在正离子方式下进行检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z748.6→m/z157.9(克拉霉素)和m/z837.0→m/z679.2(内标罗红霉素)。
　　 结果:测定阿奇霉素的线性范围为1.00～1.00×103 ng/mL,定量下限为1.00 ng/mL。日内、日间精密度(RSD)不大于9.4％,准确度(RE)在-1.3％/～5.7％范围内。20名健康受试者口服500 mg阿奇霉素后主要药动学参数Tmax为1.9±0.6 h,Cmax为O.534±0.18μg/mL,t1/2为48±5.2 h,AUC0-t为4.58±0.95μg·h/mLAUC0-∞为5.21±1.1μg·h/mL。测定克拉霉素的线性范围为1.00～3.00×103 ng/mL,定量下限为1.00 ng/mL。日内、日间精密度(RSD)不大于10％,准确度(RE)在-7.6%～6.0％范围内。18名受试者单剂量口服500 mg克拉霉素后,主要药动学参数Tmax为4.6±1.4 h,Cmax为1.22±0.35μg/mL,t1/t2为6.3±1.8 h,AUC0-t为15.8±4.4μg·h/mL,AUC0-∞15.9±4.4μg·h/mL。18名受试者多剂量口服克拉霉素后,主要药动学参数Tmax为4.8±1.7 h,Cmax为1.16±0.33μg·h/mL,t1/2为6.3±1.9 h,Cav为0.595±0.15μg/mL,DF为153±35,AUCss为14.3±3.6μg·h/mL。
　　 结论:所建立的UPLC-MS/MS法专属、灵敏,已成功用于阿奇霉素和克拉霉素的血药浓度测定和临床药动学研究。