模式生物果蝇抗肿瘤药物筛选模型的建立

摘要

本研究以黑腹果蝇作为模式生物，拟通过杂交和同源重组等遗传学方法，建立基于细胞凋亡作用的抗肿瘤药物筛选模型。实验中采用已有的绿色荧光蛋白(GFP)标记的FLP/FRT重组体系(T1)和scrib/TM6B平衡株系(T2)进行杂交，获得眼部器官芽表型带有GFP-scrib-/-的嵌合体肿瘤发生模型，表现为成虫个体眼部组织异常增生，荧光显微观察(激发光波长450-490nm)、电泳结果和western blot的结果表明有GFP的表达，说明得到的个体眼部细胞GFP的表达和眼部组织异常增生表型连锁，此外探讨了用荧光酶标仪建立这种联系的方法的可行性。此外，采用土豆加药培养基，制成了便于观察和进行药物定量的加药培养基。采用其他合成的药物和有激活JNK途径的化合物山梨醇制成加药培养基对果蝇进行初步的培养，未发现这些药物在果蝇的生长发育和肿瘤发生方面有所影响。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1果蝇作为模式生物的优势

1.2模式生物模型与传统药物筛选

1.3Scrib与肿瘤的关系

1.3.1Scrib蛋白

1.3.2Scrib是肿瘤抑制因子

1.5肿瘤与细胞凋亡

1.4JNK途径与SCRIB肿瘤模型的关系

1.6果蝇药物筛选模型的建立

1.7研究内容

1.8本实验的意义

2材料与方法

2.1实验动物

2.2试剂与仪器

2.3试验方法

2.3.1培养基制备

2.3.2实验方法

2.3.3检测方法

3结果与分析

3.1土豆培养基与普通玉米培养基的对照

3.1.2果蝇耐受DMSO阈值实验

3.2杂交实验结果

3.2.1各种系表型特征及特性

3.2.2杂交结果

3.2.3荧光显微镜观察结果

3.2.4SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果

3.2.5Western blot实验结果

3.2.6荧光酶标仪检测结果

3.3药物培养结果

3.3.1初筛药物作用的统计结果

3.3.2IMM-NK-001到IMM-NK-009样品筛选结果

3.3.3Sorbitol药物筛选结果

4讨论

4.1关于给药方法

4.2关于果蝇药物筛选模型

5结论

致谢

参考文献

作者简历