黄芩中抗蕃茄晚疫病原菌有效成分的提取及其抑菌机理的研究

摘要

本文以中草药黄芩为试验材料，以蕃茄晚疫病菌为供试菌，跟踪检测其抑菌活性，对黄芩中有效成分的提取及影响其抑菌效果的因素进行了研究。同时，从生化方面和超微结构分析了黄芩提取液的抑菌机理，结果如下：
　　1．黄芩中有效成分的最佳提取工艺：提取溶剂为无水乙醇，料液比为1:45（m：v），在65℃下提取1h，提取2次。此时，抑菌圈直径为34.3mm，其最小抑菌浓度为15.7mg/mL。
　　2．黄芩提取物抑菌效果的影响因素：酸性条件下抑菌效果比碱性条件下好。热处理、蔗糖浓度对黄芩提取物的抑菌活性影响不大。紫外照射6h后，黄芩提取物的抑菌活性受到明显影响。
　　3．定性检测结果为：黄芩提取物中可能含有黄酮类、萜类、酚类、挥发油类化合物。
　　4．通过扫描电镜和透射电镜观察，经黄芩提取液处理后，蕃茄晚疫病菌的菌体变形，质壁分离，严重者细胞壁破损，内容物大量渗出，菌体死亡。
　　5. 电导率法测定细胞膜的通透性，可能抑菌物质加入即将细胞膜破坏，导致电解质大量外渗，培养液的电导率升高。荧光标记法测定细胞膜的完整性,抑菌液浓度较大时，细胞膜的完整性受到破坏。高浓度的抑菌物质能够很大程度的破坏供试菌的细胞结构，致使大分子物质大量渗出。
　　6. 提取供试菌的DNA，通过荧光光谱进行分析，黄芩提取物中的有效成分和EB竞争方式与DNA结合，降低其活性，改变其构象。

目录

缩 略 词 表

1 引言

1.1 植源性抑菌剂

1.2 天然活性物质

1.3 天然活性物质的抑菌机理

1.4 蕃茄晚疫病菌的概况

1.5 黄芩的研究概况

1.6 本课题的研究意义

1.7 本试验技术路线

2 试验材料与方法

2.1 试验材料

2.2 试验方法

3 结果与分析

3.1 抑菌物质提取条件的优选

3.2 最小抑菌浓度

3.3 抑菌效果影响因素研究

3.4 定性检测

3.5 黄芩提取物对蕃茄晚疫病菌细胞超微结构的影响

3.6 黄芩提取物对蕃茄晚疫病菌病菌细胞膜的影响

3.7 黄芩提取物与蕃茄晚疫病菌DNA作用的荧光光谱

4 讨论

5 结论

致谢

参考文献

作 者 简 介