鹅源副粘病毒油乳剂灭活疫苗及基因疫苗的研制

摘要

利用鹅源副粘病毒辽宁株DG-01制成油乳剂灭活疫苗，接种16日龄雏鹅，被接种鹅未出现任何不良反应；从该疫苗的免疫效果来看，疫苗在免疫后一周即可产生抗体达4log2，二周后达到6log2；从免疫保护试验看，免疫后二周，用强毒攻击，免疫组保护率87％，而对照组5只鹅全部发病死亡。本研究说明所制作的鹅源副粘病毒油乳剂灭活苗能对鹅起到较好地保护作用。　　采用RT-PCR技术对鹅源副粘病毒辽宁分离株(DG-01)的HN基因进行扩增，成功扩增出1.8Kb大小的特异性条带。将此扩增产物克隆至pGEM-T载体，重组克隆质粒经鉴定后进行DNA序列测定，测序结果表明所克隆的基因片段长度为1810bp，含有一个1716bp的开放阅读框架，编码571个氨基酸。HN基因核苷酸同源性分析表明：DG-01株与我国其它9株鹅源副粘病毒的同源性为89.9～95％；与国内外NDV的同源性在82.1～95.2％之间，与国内标准强毒F48E9的同源性为84.7％，与Taiwan95和NL/96的同源性为94.1％和95.2％。　　采用PCR技术从pGEM-HN质粒中扩增出HN基因，构建了真核表达质粒pcDNA3-HN。真核表达质粒pcDNA3-HN经肌肉注射免疫鸡后，免疫组HI血清抗体效价较空白对照组高，攻毒后鸡发病、死亡均少于空白对照组，有27-36％的鸡耐过。但血清抗体效价较灭活苗组低，发病率和死亡率较灭活苗组高。实验结果表明HN基因在鸡体内得到了表达，并使鸡获得了一定的免疫力，但保护作用不及油乳剂灭活苗。

目录

论文说明：符号及缩略语的说明

摘要

前言

综述一鹅源副粘病毒病研究进展

综述二基因疫苗的研究进展

实验一鹅源副粘病毒油乳剂灭活苗的制备及对鹅的免疫攻毒试验

接要

前言

1.材料

2.方法

3.结果

4.讨论

5.结论

实验二鹅源副粘病毒辽宁分离株(DG-01)HN基因的克隆与序列分析

摘要

前言

1.材料

2.方法

3.结果

4.讨论

5.结论

实验三鹅源副粘病毒HN基因真核表达载体的构建及基因疫苗的研究

摘要

前言

1.材料

2.方法

3.结果

4.讨论

5.结论

参考文献

附录

致谢

本研究发表论文