蔬菜上镰孢菌及其相关类群真菌的分类研究

摘要

镰孢菌是重要的真菌类群，它普遍存在于土壤和动植物有机体中。镰孢菌可产生各种毒素，对粮食和农产品造成污染，危害人畜健康和安全。对蔬菜上发生的镰孢菌进行鉴定和系统研究，有助于了解镰孢菌发生和分布规律，为镰孢菌植物病害的检疫、预防和控制、镰孢菌毒素及其次生代谢产物的研究、镰孢菌遗传多样性和生态学的研究奠定基础。 作者于2005年8月到2006年6月期间，在我国6个省18个地区采集罹病及健康蔬菜植株的根茎样本157份。对样本进行组织分离培养和真菌鉴定，共鉴定出真菌19个属32个种，其中接合菌1个属1个种，子囊菌8个属8个种，无性型真菌10个属23个种。中国新记录属1个：桃孢壳属Persiciospora，中国新记录种2个(包括1个新记录属中的1个新记录种)：日本桃孢壳P．japonica，威尔士棒孢Corynespora cambrensis。分离鉴定出镰孢菌12个种及其变种。本文对鉴定出的每种真菌均作了形态及生境描述，并附有显微照片，对相近属和种进行了简单的比较和讨论。本文对一株疑似砖红镰孢(Fusarum lateritium)的菌株进行了ITS序列分析，所得序列与GenBank中的砖红镰孢序列相似性达到99％，进一步确定其为砖红镰孢。在对蔬菜植株样本进行镰孢菌的分离和鉴定过程中发现尖孢镰孢是优势菌。 从罹病及健康蔬菜植株上分离及鉴定真菌结果如下：镰孢菌(Fusarium)：F. acuminatum，F. camptoceras，F. coeruleum，F. equiseti，F. lateritium，F. moniliforme var． moniliforme，F. moniliforme vat．inermedium，F. moniliforme vat．zhejiang，F. oxysporum，E redolens，F. semitectum，F. solani；接合菌门(Zygomycota):Rhizopus stolonifer；子囊菌门(Ascomycota)：Ascodesmis sphaerospora，Chaetomium globosum，Corynascus sepedonium，Melanospora zamiae，Nectria haematococca，Persiciospora japonica，Sordaria fimicola，Thielavia basicola；无性型真菌(Anamorphic fungi)：Alternaria alternata， Aspergillus flavus，A．fumigatus var．fumigatus，Corynespora cambrensis，Epicoccum purpurascens，Plectosporium tabacinum，Penicillium crustosum，P. minioluteum，Rhizoctonia Solani，Ulocladium Botrytis，Verticillium dahliae。

目录

声明

摘要

前言

第一章蔬菜上镰孢菌研究现状

1.1镰孢菌的危害

1.1.1镰孢菌引起的主要蔬菜病害

1.1.2镰孢菌对人畜的危害

1.2镰孢菌的分类

1.2.1国外镰孢菌分类研究概况

1.2.2国内镰孢菌分类研究概况

1.2.3镰孢菌的组和种

1.3镰孢菌的鉴定

1.3.1镰孢菌的形态学特征

1.3.2镰孢菌的生长与环境

1.3.3镰孢菌的鉴定程序

1.4现代技术在镰孢菌分类上的应用

1.4.1不育性

1.4.2营养体亲和群(vegetative compatibility groups,VCG)

1.4.3大分子实验数据

1.5镰孢菌的培养和保藏

1.5.1镰孢菌的分离

1.5.2镰孢菌的纯化与培养

1.5.3镰孢菌的保藏

1.6趋势及展望

第二章蔬菜上镰孢菌及相关类群真菌的分类研究

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2菌种分离

2.1.3培养基

2.1.4镰孢菌培养及形态学观察

2.1.5镰孢菌的鉴定

2.2结果与讨论

2.2.1真菌形态描述(一)

2.2.1真菌形态描述(二)

2.2.2我国部分地区蔬菜上镰孢菌统计

2.2.3东北地区主要蔬菜作物上镰孢菌统计

2.2.4东北地区保护地内黄瓜上镰孢菌统计

2.3小结

第三章疑似砖红镰孢菌株的ITS序列分析

3.1供试菌株与仪器

3.2基因组DNA的提取

3.2.1原理

3.2.2材料与试剂

3.2.3真菌DNA提取步骤

3.2.4基因组DNA(Stock-DNA)检测

3.3 Working DNA的配制

3.4 ITS序列扩增及检测

3.4.1主要材料

3.4.2主要仪器

3.4.3反应体系

3.4.4 PCR扩增条件

3.4.5 PCR扩增结果检测

3.5小结

参考文献

致谢

附录

攻读学位期间发表的学术论文目录