细胞色素CYP2D6*10位点对美托洛尔稳态血药浓度的影响

摘要

目的：
　　 药物在体内的一般过程包括药物的吸收、分布、代谢和排泄,药物代谢主要在肝脏进行,在体内催化药物代谢的酶系称为药物代谢酶,即细胞色素P450(CYP450)。近年来国内外对于细胞色素P450的结构、功能、基因位点的突变以及药物代谢中的作用都进行着不断深入地研究。
　　 在CYP450酶系中,虽然CYP2D6在CYP450酶系中只占到了2%,但是CYP2D6却是相当重要的一员,其大约代谢20%的常用药物。同时CYP2D6有明显种族特性,白种人慢代谢的发生率占到5%～10%;而中国、日本、韩国等东方人的PM发生率则少于1%。另一方面,东方人的快代谢性的平均活性也比白种人偏小。这主要是由于东方人CYP2D6*10突变型等位基因频率高所致,其主要突变位点是188位C突变位T。已报道的发生率在不同区域的中国人中为40-65%。
　　 高血压并作为最常见的心血管疾病,也是最大的流行病之一,常引起心、脑、肾的脏器的并发症。美托洛尔是临床上治疗高血压的常用药物,对β1受体有选择性阻断作用,无部分激动活性,无稳定作用。对心脏的作用如使心肌收缩力减弱、心率和传导速度减慢。口服吸收迅速按完全,但肝脏代谢率很大,生物利用度约40%～50%。主要以游离形式存在,可透过血脑屏障和胎盘。在肝脏代谢,90%以无活性产物从尿中排出。快代谢型者的半衰期可小于3小时;慢代谢型者的半衰期可达7小时。
　　 本研究利用中空纤维液相微萃取法联用高效液相色谱法测定患者美托洛尔血药浓度,同时通过测序确定CYP2D6*10的基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism.SNP)。旨在探讨CYP2D6*10基因多态性与美托洛尔血药浓度的关系,为其个体化给药预测血药浓度提供一定的实验基础和理论依据。
　　 材料和方法：
　　 本实验收集2011年6月至12月循环科住院服用美托洛尔患者,收集标准包括,服用美托洛尔一周以上,无肝肾功能障碍,不同时服用抑制CYP2D6的药物:不同时服用有相互作用的药物。在患者知情同意情况下,抽取患者静脉外周血5mL,按实验要求处理后备用。
　　 通过优化液相微萃取实验中的供给相和接受相的酸碱浓度、萃取时间、萃取温度、萃取转速和离子强度等条件,确定了测定美托洛尔的血浆样本的前处理条件,利用中空纤维液相微萃取法联用高效液相色谱法(HF-LPME-HPLC-FLD)检测血药浓度;全血提取基因组DNA并进行CYP2D6*10位点基因多态性检测,进行基因分型。利用spss17.0软件对不同基因型组间美托洛尔血药浓度均数采用方差分析,组间比较采用t检验。
　　 结果：
　　 将53名患者按基因型分组:CYP2D6 C188T CC基因型有14(26.4%),CT基因型有21人(39.6%),TT基因型18人(34.0%),T等位基因发生率为53.8%。将得到的美托洛尔血药浓度按基因型分组,得到CYP2D6 C188T位点中TT组血药浓度测定结果为(47.6±29.9)ng·mL-1,与CT组的血药浓度(31.3±24.9)ng·mL-1和CC组的(7.5±5.2)ng·mL-1。经统计学软件分析基因型与稳态血药浓度总体有统计学意义。
　　 结论：
　　 CYP2D6 C188T位点的基因多态性与高血压患者的血药浓度存在相关性,CYP2D6 C188T中TT组的血药浓度与CC组和CT组相比,存在显著性差异。可以认为,CYP2D6 C188T位点的单核苷酸多态性对美托洛尔的代谢存在影响。