岩藻糖化寡糖抗原在附睾中的表达

摘要

哺乳动物精子离开睾丸时并未完全成熟，在通过附睾的过程中继续发育，获得向前运动的能力和使卵子受精的潜能。附睾最重要的功能是向管腔中分泌糖蛋白并为精子成熟提供合适的微环境。新近报道在人类精浆中含有大量岩藻糖化寡糖(0.3-0.4mg/ml)，且其中富含LeX和LeY抗原决定簇，推测寡糖中的岩藻糖序列可能具有增加精子寿命、增强精子向前运动的能力、促进在雌性输卵管中精卵的结合和免疫抑制等作用，但是这样大量存在且推测具有重要功能意义的岩藻糖化寡糖的米源及定位尚待阐明。本研究分别利用LeX和LeY寡糖的单克隆抗体，通过免疫组织化学、免疫斑点印迹(Dot-blot)、免疫荧光、RT-PCR等技术分析寡糖在附睾不同部位的表达。结果显示：LeX和LeY在小鼠和人的睾丸中呈阴性反应，而在附睾头部大量表达并分泌到管腔中，包被在精子表面；而进入附睾体部、尾部后，该两种抗原呈弱阳性或阴性。催化LeX和LeY合成的岩藻糖基转移酶在附睾不同部位均有表达，其产物LeX和LeY的含量变化可能由于被吸收或被糖苷酶降解所致。推测精浆中高浓度岩藻糖化寡糖主要来自于附睾。另外，结果显示两种抗原的表达情况在大鼠和狗的附睾中与在小鼠和人中有很大差别，说明种属间存在特异性。岩藻糖化寡糖在雄性生殖系统中的作用及寡糖的生物学功能有待进一步研究。

目录

前言

第一章 岩藻糖化寡糖抗原在小鼠附睾中的表达

1材料和方法

2结果

3讨论

本章小结

第二章 岩藻糖化寡糖抗原在人附睾中的表达

1材料和方法

2结果

3 讨论

本章小结

第三章 岩藻糖化寡糖抗原在大鼠、狗附睾中的表达

1材料和方法

2结果

3讨论

本章小结

结论

展望

致谢

参考文献

文献综述 哺乳动物附睾蛋白研究进展

一、附睾上皮分泌蛋白质

二、附睾分泌的糖蛋白及糖基转移酶

(一)糖蛋白的结构和功能的简介

(二)附睾分泌糖蛋白

(三)糖基转移酶与糖苷酶

三、附睾蛋白研究方法

(一)对附睾进行组织学分析

(二)附睾液中蛋白的电泳分析

(三)对附睾精子表面蛋白的分析

(四)以特异基因探针为基础的分子克隆方法

(五)筛选不同基因进行分子克隆

四、附睾中蛋白研究发展方向及待解决的问题

参考文献

缩略词表

附图

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