高产大豆异黄酮β-葡萄糖苷酶菌株的发酵工艺研究

摘要

从sp.R、sp.S、sp.39、sp.42、sp.00、sp.48、sp.848和sp.90八株霉菌中，选出了4种具有较高Genistin酶活力的菌株，它们分别是sp.R、sp.42、sp.00和sp.48，利用液体发酵的方法比较这四种霉菌的产酶活性，发现sp.R菌株产酶活力最高。sp.R菌株产Genistin水解酶的最佳发酵条件为：2.5﹪的麦麸为碳源，0.5﹪的硝酸钠为无机氮源，0.5﹪的蛋白胨为有机氮源，培养基起始p117.0，瓶装体积为40mL/250mL，按种量10﹪，培养温度30℃，摇瓶转数160rpm，培养时间84h。在此发酵条件下，sp.R菌株产酶活力为82U/mL。 对大豆异黄酮的生理活性进行了研究。通过邻苯三酚自氧化法和比色法测定Fenton反应产生的羟自由基的方法，对大豆异黄酮的抗氧化活性进行了比较研究。通过MTT比色法，对大豆异黄酮的抗肿瘤能力进行了研究。利用转基因酵母法对大豆异黄酮的雌激素活性进行了研究。结果表明：酶解甙元，糖甙型大豆异黄酮对超氧自由基的清除率达到50﹪时所需要的用量即IC50分别为0.14mg/mL，0.32mg/mL，对羟基自由基的清除率达到50﹪时所需要的用量即IC50分别为0.57mg/mL，0.63mg/mL。大豆异黄酮酶解甙元对大鼠肝癌7919细胞生长抑制率达到50﹪时所需要的用量即IC50为7.55mg/L，糖甙型大豆异黄酮对大鼠肝癌7919细胞生长抑制率达到50﹪时所需要的用量即IC50为10.35mg/L。大豆异黄酮酶解甙元的雌激素活性达到50﹪时所需要的浓度即EC50为0.31mg/L，糖甙型大豆异黄酮的雌激素活性达到50﹪时所需要的浓度即EC50为9.94mg/L。酶解甙元生理活性强于相应的糖甙型大豆异黄酮。

目录

第一章文献综述

第二章高产大豆异黄酮糖基水解酶菌株的发酵工艺研究

第三章大豆异黄酮甙元的生理活性

第四章结论与展望

参考文献

致谢

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