固相萃取与毛细管电泳在线联用同时测定尿液中的二甲双胍和格列苯脲

摘要

二甲双胍(Metformin，MET)和格列本脲(Glibenclamide，GLB)是2型糖尿病患者常用的口服类降糖药，临床常通过MET和GLB联合用药来达到较满意的血糖控制效果。但若用量不当则会引起低血糖反应及乳酸中毒等一系列副作用。因此同时监测人体体液中MET和GLB的含量，对临床合理安全用药和药代动力学及生物等效性研究都具有十分重要的意义。但由于两种药物极性差异较大，同时测定面临较大困难，且有研究显示，正常服用药物后，人体体液中药物含量极低，仅为纳克级每毫升，这又为同时测定提出了新的挑战。
　　本研究利用实验室自行搭建的固相萃取与毛细管电泳在线联用(SPE-CE-UV)系统建立了同时检测人体尿液中MET和GLB的新方法。该在线联用系统与其它已报道的系统相比，自动化程度更高，操作更方便，可以通过电脑预设程序设定最佳延迟时间，实现SPE洗脱栓中高浓度部分的区带切割(zone-cutting)和CE进样。且通过应用离子对固相萃取(IPSPE)技术提高了方法灵敏度，克服了同时富集两种药物的困难。
　　本研究考察了实验参数对富集分离和检测的影响。在对系统的操作条件进行优化后，对该分析方法进行了评价。实验数据表明，与独立的固相萃取和毛细管电泳相比，系统中的SPE富集倍率和CE柱效几乎没有损失;在三个不同浓度(50μg/L，200μg/L，300μg/L)水平的加标回收率为92.3％～101.9％，精密度为2.4％～4.6％(RSD，％，n=5)，二甲双胍和格列苯脲的检出限分别为3.4μg/L和2.5μg/L(S/N=3)，表明该方法具有精密度高、检出限低、自动化程度高、分析速度快等优点，具有较好的应用前景。

目录

声明

摘要

1．引言

1．1 二甲双胍和格列苯脲

1．2 以往报道的二甲双胍和格列苯脲的测定方法

1．3 本论文提出方法

2．固相萃取方法的建立

2．1 引言

2．2 实验部分

2．2．1 仪器与试剂

2．2．2 溶液的配制

2．2．3 萃取装置及萃取操作一般步骤

2．3 结果与讨论

2．3．1 萃取条件优化

2．3．2 萃取性能的评价

2．4 小结

3．毛细管电泳分离方法的建立

3．1 引言

3．2 实验部分

3．2．1 仪器与试剂

3．2．2 溶液的配制

3．2．3 实验条件

3．2．4 电泳操作一般步骤

3．3 结果与讨论

3．3．1 背景电解质溶液pH值的优化

3．3．2 背景电解质盐溶液浓度的优化

3．3．3 分离电压的优化

3．4 小结

4．SPE-CE-UV联用装置的搭建及其在实际尿样测定中的应用

4．1 引言

4．2 实验部分

4．2．1 仪器与试剂

4．2．2 溶液的配制

4．2．3 实验装置的搭建

4．3 结果与讨论

4．3．1 系统操作条件优化

4．3．2 方法的评价

4．4 小结

结论与展望

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表学术论文情况

致谢