流式细胞术检测CsA及FK506对肾移植患者Th亚群的影响

摘要

目的： 通过与健康人群比对分析，研究肾移植患者术后Th1细胞和Th2细胞的分化情况以及两种抗排斥药物(CsA，FK506)对Th1细胞和Th2细胞的影响，了解这两种常用的钙调磷酸酶抑制剂免疫调节作用的异同，以求正确评估两药在抗排斥反应的差别，为患者预防排斥反应及为肾移植术后制定更加合理的免疫抑制方案提供实验依据。 方法： 分成三组：健康对照组(n=48)、CsA组(n=21)、FK506组(n=22)。抽取静脉全血，以肝素钠抗凝，用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)刺激T淋巴细胞4小时，用荧光标记的抗CD3和CD8单克隆抗体与T细胞表面上相应的抗原分子相结合，溶血、通透后加入抗IFN-γ与IL-4抗体，同含相应细胞内抗原的淋巴细胞相结合。运用流式细胞仪选定CD3+淋巴细胞，再以CD3+淋巴细胞设门，门内用CD8与IFN-γ或CD8与IL-4分别建立双参数直方图，找出CD3+/CD8-/IFN-γ+细胞(Th1细胞)和CD3+/CD8-/IL-4+细胞(Th2细胞)。以百分率表示Th1和Th2占总T细胞比率。结果使用SPSS12.0软件进行统计分析，以均数±标准差描述Th1细胞和Th2细胞分化情况，并分析CsA与FK506两种免疫抑制剂对肾移植患者Th1和Th2细胞的影响。 结果： 1．所有肾移植患者Th1细胞占总T细胞的百分率(14.25±2.10)低于健康对照组Th1细胞百分率(15.76±2.74)，与健康对照组对比有明显差异(P<0.05)。FK506药前的Th1细胞百分率(13.54±2.20)明显低于健康对照组，与健康对照组有非常显著的差异(P<0.05)，但CsA药前的Th1细胞百分率(14.99±1.73)减少的不明显，与健康对照组无显著性意义(P>0.05)，并且FK506药前Th1与CsA药前的Th1百分率相比有显著性意义(P<0.05)。所有肾移植患者Th2细胞百分率(1.15±0.45)、CsA药前Th2(1.19±0.56)、FK506药前Th2细胞百分率(1.12±0.33)稍低于健康对照组(1.28±0.56)，但几组之间无显著性意义(P>0.05)。 2．CsA药后Th1(8.48±1.01)与FK506药后Th1(8.16±1.51)都有明显下降，但二者比较无显著性意义(P>0.05)；CsA药后Th2(1.21±0.54)与FK506药后Th2(1.16±0.25)相比无显著性意义(P>0.05)。 3．CsA药后Th1细胞百分率明显低于CsA药前，两者之间比较有显著性意义(P<0.05)，同样，FK506药后Th1细胞百分率也明显低于FK506药前，两者之间比较有明显差异(P<0.05)。CsA药前与CsA药后Th2及FK506药前与FK506药后Th2相比均无显差异(P>0.05)。 4．CsA药前、药后Th1细胞百分率的差(6.52±1.44)大于FK506药前、药后Th1细胞百分率的差(5.38±1.67)，并且两者比较后有显著性意义(P<0.05)。 结论： 1．肾移植组Th2细胞百分率与正常组比较无明显差异，说明Th2细胞分化可能不受CsA与FK506的影响。 2．CsA及FK506在用药后两小时对肾移植患者的Th1细胞有明显的抑制作用且抑制效果相同。 3．用药12小时后，FK506仍对肾移植患者的Th1细胞有抑制作用。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 关于肾移植术后诊断方面的研究现状

致谢