流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群

摘要

目的:建立人和小鼠Th1和Th2细胞的检测方法,探讨两者在流式细胞检测方面的不同.方法:采用PMA和离子霉素共同刺激外周血单个核细胞,观察在不同时间和不同剂量的PMA刺激下外周血T淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8表达的变化.采用多色荧光共同标记分析技术检测外周血单个核细胞IL-4和IFN-γ的表达.结果:在PMA和离子霉素共同刺激后4h,人外周血T淋巴细胞表面CD4表达迅速下降,而小鼠T淋巴细胞表面CD4表达仅轻度下降.采用多色分析技术可以有效的检测Th1的细胞和Th2细胞.采用CD3、CD8设门分析可以有效的区分人Th细胞;采用CD4设门可以有效区分小鼠Th细胞.结论:人细胞内因子的检测宜采用4色染色分析技术,小鼠细胞内因子检测采用3色染色技术即可.