高剂量X线照射人鼻咽癌CNE1细胞株后MDR1的表达及其机制的初步研究

摘要

肿瘤的多药耐药性(multidrug resisitance，MDR)是化疗失败的一个主要原因也是目前肿瘤治疗研究的热点。MDR是多因素共同作用的结果，目前比较肯定的肿瘤MDR产生的机制为多药耐药基因(multidrug resisitance gene 1，MDR1)及其编码产物P-糖蛋白(p-glycoprotein，P-gp)的过度表达。近年来临床研究表明，放射治疗后的肿瘤患者对于化疗的敏感性下降，并且一些相关研究表明在经过X线照射后的肿瘤细胞或者组织中MDR1和P-gp的表达均高于照射前[1-3]。提示放疗有可能导致某些肿瘤产生多药耐药性，目前相关研究报道还比较少。深入研究参与调控MDR1基因表达水平的相关信号传导通路，可以为肿瘤治疗开辟新途径，提供新的靶点。 目的：RT-PCR研究累积高剂量X线照射后MDR1 mRNA随时间的表达变化趋势。并且利用基因芯片技术，筛选累计高剂量X线照射前后CNE1细胞株中与肿瘤发生发展有关的差异表达基因，初步探讨MDR1表达变化的机制。 方法：选取人鼻咽癌CNE1细胞株进行体外培养及X线照射。照射方法为每次照射200cGy，隔天照射，共照射25次，累积剂量50Gy。分别收集人鼻咽鳞癌细胞株CNE1细胞和X线照射后得到的CNE1'/R细胞(分别于照射完成后1、7、21 、28、35、42、49天收集)，利用RT-PCR技术检测MDR1 mRNA的表达。取其表达上调最明显的一组细胞提取总RNA，反转录成cDNA后与Catalog No．OHS-044芯片进行杂交，筛选表达差异的基因。采用RT-PCR技术，对部分表达差异的基因进行验证分析。 结论：X线照射前CNE1细胞中已经有较弱的MDR1 mRNA表达，累积50GyX线照射可诱导CNE1细胞长时间表达MDR1 mRNA，表达强度与照射前相比差异具有显著性。X线照射后引发CNE1细胞内多通路多基因发生变化，它们可能相互调节、协同作用直接或者间接的诱导辐射后MDR的发生。累积大剂量X线照射后，CNE1细胞内BCL-2、MMP7基因表达高于照射前，这同基因芯片方向一致，说明芯片结果可信。

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综述 肿瘤的多药耐药性分子机制的研究现状

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