低氧对小鼠肝癌Hca-F细胞侵袭转移的影响及Fucoidan干预作用研究

摘要

目的:肿瘤是严重危害人类健康的杀手之一，目前对肿瘤治疗的主要手段有手术治疗、放射治疗及化学治疗，但毒副作用大。海洋中生物资源丰富，富含具有药用价值的活性物质，开发海洋药物已经成为当今研究的热点，其中多糖类物质具有多种生物活性[1，2，3]。本研究采用褐藻中褐藻多糖硫酸酯(fucoidan)，作用于小鼠肝癌Hca-F细胞，探讨低氧对小鼠肝癌Hca-F细胞侵袭转移的影响及Fucoidan干预作用研究
　　 方法:1.氯化钴(CoCl2)建立化学低氧模型，CoCl2浓度设置成不同梯度采用MTT法筛选CoCl2处理浓度及时间。将125μg/ml、250μg/ml、500μg/ml、1000μg/ml浓度的fucoidan作用于缺氧处理小鼠肝癌Hca-F细胞24、48h，采用MTT法检测fucoidan在体外对小鼠肝癌Hca-F细胞的增殖抑制作用。筛选fucoidan作用浓度及时间。
　　 2.实验设置常氧组、低氧组及低氧后fucoidan干预组，RT-PCR、Western-blot及免疫荧光技术检测HIF-1α和NF-κB的表达，观察HIF-1α和NF-κB在蛋白和mRNA水平的表达变化，探讨CoCl2及fucoidan对小鼠肝癌Hca-F细胞的影响。采用MTT和Transwell模型实验检测低氧对小鼠肝癌Hca-F细胞粘附、迁移和侵袭能力的影响，及fucoidan对小鼠肝癌Hca-F细胞的干预作用。
　　 结果:当CoCl2浓度为100μmol/L，作用Hca-F细胞24h时，可上调HIF-1α和NF-κB表达水平(P＜0.01)，增强Hca-F细胞粘附、迁移和侵袭能力。Fucoidan浓度为500μg/ml作用细胞24h不抑制细胞增殖，且下调HIF-1α和NF-κBmRNA及蛋白表达水平且细胞粘附、迁移和侵袭能力下降。
　　 结论:低氧环境上调HIF-1α和NF-κB表达、促进小鼠肝癌Hca-F细胞侵袭转移活性，fucoidan对其有干预作用。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 CoCl2建立缺氧诱导模型及Fucoidan对低氧所致的小鼠肝癌Hca-F细胞增殖影响

材料和方法

结果

讨论

第二部分 Fucoidan对低氧诱导下小鼠肝癌Hca-F细胞HIF-1α和NF-κB表达影响

材料和方法

结果

讨论

第三部分 Fucoidan对低氧诱导下小鼠肝癌Hca-F细胞转移的抑制作用

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述

致谢