粪肠球菌对大鼠根尖周炎NF-κB表达影响的免疫组织化学染色研究

摘要

目的:建立大鼠根尖周炎动物模型，研究粪肠球菌对核转录因子NF-κB的表达影响。
　　方法:选取6周龄健康雄性SD大鼠40只，采用小号球钻于右侧下颌第一磨牙颌面近中窝行开髓术后，随机分为A、B两组，每组各20只。A组开髓以后，髓腔内封入PBS缓冲液棉球，设为未封菌组;B组开髓以后，髓腔内封入粪肠球菌与PBS缓冲液调制的菌悬液棉球，设为封菌组。两组均采用进口玻璃离子粘固剂封闭髓腔。左侧下颌第一磨牙为正常对照组。常规条件饲养，A、B两组分别于术后1周、2周、3周、4周四个时间点随机各取5只鼠，乙醚麻醉后，进行多聚甲醛心内固定，剖取下颌骨，中线处纵行分离，修整为包含第一、二、三磨牙的约1×1×1cm3正方形骨组织块，EDTA脱钙，低温液氮冷冻，OCT包埋，平行于牙长轴矢状面，制作冰冻切片。采用HE染色法观察根尖区组织炎症的病理特征，免疫组织化学染色法检测NF-κB在大鼠根尖周炎组织中的表达与分布，并进行统计学分析。
　　结果:
　　1.HE染色结果HE染色结果可见，实验侧下颌第一磨牙根尖周组织局部炎性渗出，形成浆液性根尖周炎，随炎症进展，炎性浸润向周围牙槽骨扩散蔓延，形成局限性牙槽骨骨髓炎。正常对照组未见病理表现。
　　根尖周炎模型建立术后1周，可见实验侧根尖周炎病变范围较小，浆液性渗出伴随血管扩张，形成炎性细胞浸润灶，以淋巴细胞、中性粒细胞、巨噬细胞为主;术后2周可见根管内牙髓坏死，根尖周炎症区域增大，炎性浸润含有大量中性粒细胞浸润;术后3周到4周，病灶区淋巴细胞大量浸润。
　　2.免疫组织化学染色结果:
　　1)术后1周、2周、3周、4周，A组、B组的根尖周炎症区域中均可见NF-κB呈阳性表达。从1周至2周，其表达量增加，2周时NF-κB的表达量呈现高峰，3周开始降低，4周时NF-κB阳性细胞表达量最低，各个时间点的表达差异均具有统计学意义(P＜0.05)。
　　2)术后1周到4周，NF-κB阳性细胞的表达B组明显高于A组，两组差异具有统计学意义(P＜0.05)，且A组、B组在各时间点表达趋势均一致。
　　3)正常对照组可见少量NF-κB阳性细胞表达，且A组、B组的阳性细胞表达量均高于正常对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:
　　1.NF-κB的表达情况与根尖周炎的进程密切相关，提示NF-κB参与了根尖周炎的炎症反应过程。
　　2.NF-κB的表达情况与粪肠球菌感染为主的根尖周炎过程密切相关，提示粪肠球菌可能加重了根尖周区域炎症反应。