基于结构的STAT3小分子抑制剂虚拟筛选及其初步活性筛选

摘要

STAT3是EGFR、IL-6/JAK、Src等多个致癌性酪氨酸激酶信号通路的汇聚点，是当前国际上热门的抗肿瘤药物靶标。目前己报道的STAT3抑制剂或活性不高，或选择性差，并且大多不能高效地透过细胞膜发挥抑制作用。故本实验拟采用虚拟筛选的方法筛选STAT3蛋白SH2结构域的小分子抑制剂，并初步检测筛选出来的小分子的抑制活性。
　　目的:通过计算机虚拟筛选，寻找信号转导和转录活化因子3(STAT3)的小分子抑制剂，并测量其活性，为发现靶向STAT3蛋白SH2结构域的小分子先导化合物提供帮助。
　　方法:分析STAT3蛋白SH2结构域的三维结构，建立包含SPESC、Chembridge、Enamine和ChemDiv化合物数据库的小分子数据库，应用SchrodingerSuite2009中的Glide模块对小分子数据库进行虚拟筛选，对筛选出的结构进行受体与小分子间的相互作用模式分析，通过荧光偏振竞争性实验的方法测量小分子化合物对STAT3的抑制活性。
　　结果:根据虚拟筛选结果，通过对接打分函数和人工识别相互作用挑选出一系列有可能的STAT3小分子抑制剂，通过检测其活性，最终发现化合物4具有一定的抑制活性。
　　结论:通过计算机辅助药物设计和分子间相互作用分析，初步确定了一系列有可能的STAT3小分子抑制剂，通过检测这些小分子对STAT3蛋白的抑制活性，最终发现了1个具有一定抑制活性的小分子化合物，为今后发现STAT3小分子抑制剂的先导化合物奠定了基础。

目录

声明

摘要

前言

一、材料和方法

1．材料

1．1 实验仪器

1．2 质粒和菌株

1．3 主要实验试剂

2．方法

2．1 计算机虚拟筛选

2．2 荧光偏振竞争性实验检测小分子抑制活性

二、结果

1．虚拟筛选

2．受体与小分子间相互作用

3．STAT3蛋白制备

4．小分子抑制剂活性筛选

三、讨论

四、结论

参考文献

STAT3在肿瘤发生发展中的作用

攻读学位期间发表论文情况

致谢