Snail诱导的FTL在乳腺癌发生发展中的作用

摘要

目的：乳腺癌在全世界女性癌症发病率居首位，并且易转移复发，所以也是死亡率很高的疾病。近年来许多研究表明，铁代谢相关基因和肿瘤的发生发展有密切关系，可作为癌症预后指标。铁代谢基因铁储蛋白的亚基 FTL,虽然在许多癌症中高表达，包括乳腺癌、结直肠癌、肝癌和胰腺癌等，但其在乳腺癌中的作用研究较少，对肿瘤影响的机制不是很清楚。Snail主要又是介导乳腺癌发生转移的重要蛋白，而且近些年的研究发现 Snail对肿瘤的代谢调控也很重要。我们之前研究发现，Snail在乳腺正常细胞和乳腺癌细胞 MCF-7中都能上调 FTL的表达，说明 Snail可能通过介导 FTL的表达对乳腺癌的发生发展产生作用。因此，我们探究了 FTL和 Snail在乳腺癌发生发展中的作用，及 FTL对肿瘤细胞的迁移、生长的促进作用。
　　方法：为研究 Snail和 FTL在乳腺癌发生发展的作用，snail是如何调控 FTL的表达，我们首先在多种肿瘤细胞中分别构建了 Snail过表达及敲低的稳转细胞株，并用实时荧光定量PCR技术检测Snail对FTL表达的影响。为了进一步验证Snail对 FTL的调控作用，我们构建了 FTL启动子的荧光素酶报告基因质粒。在HEK293T细胞中，共转染 Snail与荧光素酶报告基因质粒，并检测 Snail对 FTL启动子活性的影响。下一步我们进行了 FTL的功能研究。我们首先在正常乳腺细胞系 MCF-10A、人乳腺癌细胞 MCF-7和 MDA-MB-231中构建了 FTL过表达和敲低的稳转细胞系，并在过表达snail的MCF-10A、MCF-7和MDA-MB-231细胞中构建了 FTL过表达和敲低的稳转细胞系。CCK8、Transwell和流式细胞检测分别检测细胞的生长，迁移能力和细胞周期变化。
　　结果：在正常乳腺细胞系MCF-10A、人乳腺癌细胞MCF-7细胞中，snail可以促进 FTL的表达，敲低 snail能减少 FTL的表达，但在人乳腺癌细胞 MDA-MB-231中FTL的表达没有发现受snail的影响。荧光素酶基因实验显示，snail可能并不直接作为转录激活因子调控 FTL的表达，而是通过其他方式调控 FTL的表达。在过表达FTL的细胞中，细胞生长和迁移能力增强；相应的，在敲低FTL时，细胞的生长和迁移能力下降，细胞周期被阻滞在G2/M期。
　　结论：1.我们的研究表明snail可促进FTL的表达，但不是通过其转录调控直接结合于FTL的启动子，可能通过其他调控途径间接促进FTL表达。2.FTL可促进乳腺癌的生长和迁移。

目录

前言

材料和方法

一、材料

二、实验方法

结果

1. Snail能够促进FTL的表达

2. FTL不是Snail转录调控的直接靶基因

3. FTL促进Snail的转录表达

4. FTL促进细胞生长

5. FTL促进细胞迁移

6. FTL影响细胞周期

讨论

结论

参考文献

三．综述:铁代谢和Snail在肿瘤发生发展中的作用

致谢