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论文说明:缩略语
声明
第1章绪论
1.1引言
1.2食物过敏
1.2.1食物过敏反应的免疫学机制
1.2.2食物过敏原
1.3淡水鱼类过敏
1.3.1鲤鱼、青鱼、草鱼、鲢鱼简介
1.3.2淡水鱼类过敏
1.3.3鲤鱼小清蛋白
1.4抗原性及免疫交叉反应性
1.5本课题研究的目的和意义
第2章鲤鱼小清蛋白的分离纯化
2.1引言
2.2材料与设备
2.2.1试剂与材料
2.2.2主要设备
2.2.3溶液的配制
2.3实验方法
2.3.1鲤鱼肌肉的预处理
2.3.2鲤鱼蛋白的粗提
2.3.3煮沸除杂蛋白
2.3.4硫酸铵沉淀
2.3.5离子交换层析法提取鲤鱼小清蛋白
2.3.6 SDS-PAGE电泳分析
2.3.7 PAGE电泳分析
2.3.8 蛋白浓度的测定
2.4结果
2.4.1预处理的效果
2.4.2离子交换层析结果
2.4.3 电泳鉴定纯度
2.4.4蛋白质含量变化
2.5.讨论
2.5.1 预处理过程对离子交换层析的影响
2.5.2离子交换层析条件的选择
2.5.3蛋白纯度鉴定方法的可行性
2.6本章小结
第3章鲤鱼小清蛋白抗原性的研究
3.1引言
3.2材料与设备
3.2.1试剂
3.2.2仪器与耗材
3.2.3溶液配制
3.3方法
3.3.1试验动物
3.3.2抗原的准备
3.3.3免疫方案
3.3.4血清的分离
3.3.5建立检测抗体效价的间接ELISA方法
3.3.6间接ELISA测抗体效价
3.3.7建立间接竞争ELISA检测抗体特异性的方法
3.3.8间接竞争ELISA法检测抗体特异性
3.4实验结果
3.4.1抗血清效价间接ELISA检测方法的建立
3.4.2免疫过程中抗体效价的变化
3.4.3间接竞争ELISA检测抗体特异性方法的建立
3.4.4 间接竞争ELISA法测抗体特异性
3.5讨论
3.5.1多克隆抗体的制备
3.5.2抗体效价的检测方法
3.5.3兔对鲤鱼小清蛋白的免疫应答
3.5.4抗体特异性
3.6本章小结
第4章免疫交叉反应的研究
4.1引言
4.2仪器与试剂
4.2.1试剂
4.2.2仪器与耗材
4.3方法
4.3.1 草鱼、青鱼、鲢鱼蛋白的粗提
4.3.2免疫印迹法研究免疫交叉反应
4.3.3间接竞争ELISA法研究免疫交叉反应
4.4实验结果
4.4.1青鱼、草鱼、鲢鱼蛋白粗提物的含量
4.4.2免疫印迹的结果
4.4.3间接竞争ELISA的结果
4.5讨论
4.5.1青鱼、草鱼、鲢鱼蛋白的粗提
4.5.2免疫印迹中蛋白质转移的问题
4.5.3免疫印迹的背景与信号问题
4.5.4关于竞争抑制ELISA
4.5.5淡水鱼类过敏原交叉反应
4.6本章小结
第5章结论
致 谢
参考文献
硕士期间成果