奥伐尼和胡椒碱对成熟鼠脊髓胶状质神经元自发兴奋性突触传递的研究

摘要

目的：短瞬受体电位(TRP)通道，TRPV1和TRPA1通道在感觉传导纤维介导的外周至中枢神经系统的疼痛信号传递中起了重要作用。辣椒素类镇痛药，如奥伐尼和胡椒碱通过激活背根神经节(DRG)神经元胞体上的TRPV1通道并增加TRPV1通道的表达起到镇痛作用。同为辣椒素类镇痛药的RTX不仅可激活DRG神经元胞体的TRPV1通道，而且还可通过激活DRG神经元中枢末梢的脊髓胶状质(substantia gelatinosa，SG，laminaⅡof Rexed)神经元上的TRPV1通道达到镇痛效果。脊髓胶状质层作为中枢神经系统躯体感觉传导通路(sensorypathway)中痛觉信息传入的初级门户，接受躯体性外周痛觉信号中初级传入纤维的投射，在疼痛信号的传导中有着重要的意义。所以，本实验主要为了解辣椒素类镇痛药奥伐尼和胡椒碱是否也可通过激活脊髓SG神经元TRP通道，起到镇痛作用。
　　 方法：成熟雄性SD鼠(6-8周)经乌拉坦腹腔注射麻醉(1.2-1.5g/kg)后，行腰骶部椎板切除术。取出腰骶部脊髓(L1-S3)，振动切片，片厚600-800微米(μm)。不同溶度奥伐尼、胡椒碱及TRPA1通道抑制剂HC-030031和TRPV1通道抑制剂抗辣椒素的溶液灌注记录槽，盲法全细胞膜片钳技术记录SG神经元的自发兴奋性突触后电流(sEPSC)。
　　 结果：固定电位保持在-70mV时，0.1-40μM奥伐尼灌注5分钟，自发兴奋突触后电流(sEPSC)的频率和波幅无显著性变化(P>0.05)。另一方面，胡椒碱灌注2分钟sEPSC的频率呈剂量-依赖关系增加，EC50为52.31μM(Hill系数为4.54)，伴随波幅小幅度增加。胡椒碱增加sEPSC频率的效果是可逆的，20分钟和1小时以后重复用药作用可被同化。而胡椒碱的这一特性可被TRPV1通道抑制剂抗辣椒素(10μM)或TRPA1通道抑制剂HC-030031(50μM)阻断。
　　 结论：胡椒碱能激活DRG神经元中枢终端的TRPV1和TRPA1通道，导致释放至SG神经元的自发兴奋性左旋谷氨酸增加，而奥伐尼不能激活DRG神经元中枢终端的TRP通道。这提示DRG神经元胞体和中枢末梢部位TRP通道类型可能不同。