银杏外种皮有效成分的含量分析及其提取分离的研究

摘要

本研究选用两个银杏核用主栽品种佛指和洞庭皇为试验材料，从盛花后20d起，每隔15d定期分别随机采集各品种试验树100粒种实，制备银杏外种皮提取物(EGBE)，采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)等技术测定外种皮中银杏内酯、类胡萝卜素、总黄酮等有效成分的含量，比较分析了高效薄层层析(HPTLC)、聚酰胺柱层析(PACCT)和硅胶柱层析(SGCCT)等分离方法对类胡萝卜素和黄酮类化合物成分的分离效果。 结果表明：银杏种实成熟采收后，佛指和洞庭皇两个品种外种皮中的类胡萝卜素、总黄酮、银杏内酯含量分别为0.9863mg/g、0.5238mg/g、0.0595mg/g和1.2991mg/g、0.5774mg/g、0.0619mg/g；不同提取溶剂处理中，用无水乙醚提取的类胡萝卜素含量最高，后依次为丙酮、混合试剂(石油醚：丙酮=4：1)和石油醚；不同提取方法处理中，采用回流提取法脱脂处理的银杏外种皮总黄酮含量明显高于萃取法；黄酮类化合物分离方法的不同处理中，离心薄层层析和聚酰胺柱层析的分离效果优于硅胶色谱柱层析。

目录

论文说明：符号与缩写

摘要

1前言

1.1研究的目的和意义

1.2研究的现状与进展

1.2.1银杏资源的综合开发利用

1.2.2银杏外种皮的研究与开发利用

1.2.3银杏有效成分含量变化的分析研究

1.2.4银杏有效成分含量的测定技术

1.2.5银杏有效成分的提取与分离

1.2.6银杏外种皮有效成分的提取、测定与分离

1.3研究中拟解决的主要问题

2材料与方法

2.1试验材料

2.2样品的采集与保存

2.3主要试药和试剂

2.4主要仪器和设备

2.5银杏外种皮有效成分的提取

2.5.1银杏黄酮类化合物的提取

2.5.2银杏内酯的提取

2.5.3银杏类胡萝卜素的提取

2.6银杏外种皮有效成分含量的测定

2.6.1银杏外种皮总黄酮含量的测定

2.6.2银杏外种皮类胡萝卜素含量的测定

2.6.3银杏内酯A、B含量的测定

2.7银杏外种皮有效成分的分离

2.7.1离心薄层色谱法

2.7.2聚酰胺柱层析法

2.7.3硅胶柱层析法

2.8资料的整理与统计分析

3结果与分析

3.1银杏外种皮有效成分提取物的制备

3.2银杏外种皮有效成分测定的精密度、重现性、稳定性和回收率的检验

3.2.1银杏外种皮总黄酮含量测定的精密度、重现性、稳定性和回收率的检验

3.2.2银杏外种皮槲皮素含量测定的精密度、重现性、稳定性和回收率的检验

3.2.3银杏外种皮山奈酚含量测定的精密度、重现性、稳定性和回收率的检验

3.2.4银杏外种皮异鼠李素含量测定的精密度、重现性、稳定性和回收率的检验

3.2.5银杏外种皮银杏内酯A含量测定的精密度、重现性、稳定性和回收率的检验

3.2.6银杏外种皮银杏内酯B含量测定的精密度、重现性、稳定性和回收率的检验

3.3银杏外种皮总黄酮及不同黄酮苷元的提取及其含量测定

3.3.1不同提取方法对类黄酮含量的影响

3.3.2银杏不同品种类黄酮含量的年周期变化

3.3.3银杏品种间黄酮苷原槲皮素、山奈酚、异鼠李素含量的年周期变化

3.4银杏外种皮类胡萝卜素的提取及其含量测定

3.4.1提取溶剂对银杏外种皮类胡萝卜素提取结果的影响

3.4.2提取时间对类胡萝卜素含量的影响

3.4.3提取溶剂和提取时间对银杏外种皮类胡萝卜素提取结果的影响

3.4.4银杏品种间类胡萝卜素含量的年周期变化

3.5银杏外种皮银杏内酯A、B含量的变化

3.5.1银杏品种对银杏内酯A、B含量的影响

3.5.2盛花后天数对银杏内酯A、B含量的影响

3.6银杏外种皮不同保存处理方法对类胡萝卜素含量的影响

3.7银杏外种皮有效成分的离心薄层色谱法分离

3.7.1类胡萝卜素分离

3.7.2黄酮类化合物分离和鉴定

3.8银杏外种皮类黄酮聚酰胺柱层析分离

3.9银杏外种皮有效成分的硅胶柱层析分离

3.9.1银杏外种皮类胡萝卜素的硅胶柱层析分离

3.9.2银杏外种皮类黄酮的硅胶柱层析分离

4小结与讨论

4.1小结

4.2 讨论

4.2.1银杏外种皮有效成分利用对品种的选择

4.2.2银杏外种皮有效成分对分离方法的选择

4.2.3银杏外种皮有效成分含量对测定方法的选择

4.2.4银杏外种皮提取物的制备及其标准化生产

参考文献

致谢

攻读硕士学位研究生期间发表的学术论文