鸡组织中尼卡巴嗪残留的HPLC检测法及消除规律研究

摘要

尼卡巴嗪(Nicarbazin)是一种广谱抗球虫药物。我国规定尼卡巴嗪在鸡组织中的残留标示物为4，4，-二硝基均二苯脲(DNC)，最大残留限量为200 μg/kg。本研究建立了鸡组织(肌肉、肝脏、肾脏)中尼卡巴嗪残留的高效液相色谱检测方法，并对其在鸡体内的残留消除规律进行了研究。 鸡组织样品经乙腈提取，正己烷液-液萃取，碱性氧化铝小柱固相萃取净化，三氯甲烷淋洗后以甲醇-乙腈(90/10，v/v)洗脱，洗脱液浓缩后用适量流动相溶解，过滤。选用ODS高效液相色谱柱进行色谱分析，流动相为乙腈-水(50/50，v/v)，紫外检测波长340 mm。DNC标准品工作液在0.04～50.0 mg/L 度范围内线性关系良好(r=0.9999)。组织中药物添加浓度分别为0.1 mg/kg、0.2 mg/kg、0.4 mg/kg时，肌肉样品中药物平均回收率为(80.21±0.95)％：肝脏样品中药物平均回收率为(75.37±5.04)％；肾脏样品中药物平均回收率为(78.84±2.78)％。日内、日间变异系数分别低于7％和10％。在该检测条件下，检测限可以达到0.02 mg/kg，可以满足鸡组织中尼卡巴嗪残留检测的要求。 将尼卡巴嗪以临床推荐剂量(125 mg/kg)添加到饲料中饲喂肉鸡，连续给药2周，并在停药后分别于第0、1、2、3、4、5和6 d各宰杀5只鸡，研究尼卡巴嗪在鸡各组织中的残留消除情况，并进行休药期的估算。利用已建立的鸡组织中尼卡巴嗪残留HPLC检测方法测定组织中尼卡巴嗪标示残留物——DNC的浓度。检测结果表明，肝脏中DNC浓度最高，消除速度最慢，是尼卡巴嗪残留检测的靶组织，肌肉中药物残留相对较少且消除较快，肾脏中药物残留最少且很快消除。各组织中的DNC残留在停药后第4 d均降至最高残留限量(200μg/kg)以下，按照国内常用的实测浓度法估算休药期，建议尼卡巴嗪在鸡的休药期为4 d。

目录

文摘

英文文摘

符号说明

第一部分鸡组织中尼卡巴嗪残留的HPLC检测方法研究

1材料

1.1药品及试剂

1.2试液的配制

1.3仪器及其它

2方法

2.1样品的采集

2.2样品前处理

2.3色谱条件

2.4标准曲线绘制

2.5样品回收率测定

2.6精密度测定

2.7稳定性观察

3结果

3.1色谱行为

3.2标准曲线

3.3样品回收率

3.4精密度

3.5稳定性

3.6最低检测限（LOD）和最低定量限（LOQ）

4讨论

4.1尼卡巴嗪残留标示物

4.2样品提取过程

4.3样品净化过程

4.4流动相选择

4.5检测方法的评价

4.6样品处理过程的注意点

第二部分鸡组织中尼卡巴嗪残留消除规律研究

1材料

1.1药品及试剂

1.2仪器及其它

2方法

2.1给药方案

2.2样品采集

2.3样品测定

3结果

4讨论

全文结论

文献综述

参考文献

致 谢

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