MyoG和Myf5基因对京海黄鸡重要性状的遗传效应及表达规律研究

摘要

本研究采用PCR-SSCP技术检验京海黄鸡第十世代核心群母鸡的肌细胞生成素(MyoGenin，MyoG)基因和生肌因子5(myofactor-5，Myf5)基因的多态性，运用一般线性模型将其与京海黄鸡的经济性状进行关联分析，以探讨这两个基因对京海黄鸡的生长和繁殖性状的影响;同时采用实时荧光定量法研究了这两个基因在京海黄鸡不同组织，不同生长时期的表达规律。主要研究结果如下: 1.以MyoG基因为候选基因，对该基因的外显子区进行了单核苷酸多态性检测。结果表明，MyoG基因外显子1上存在一个G102A变异，外显子3上存在一个T2946C变异，分别形成基因型AA、AB、BB和CC、CD、DD。关联分析结果显示，在生长性状上，MyoG基因第一外显子102bp处变异形成的3种基因型，其中BB型个体2、4、6周龄体重显著高于AB型个体(P＜0.05)，BB型个体8周龄体重显著高于AA型个体(P＜0.05)。在整个生长过程中，BB型个体为优势个体。在外显子3的多态性形成的基因型上，0、2、4、8、12、16周龄DD型个体体重极显著高于CC型个体(P＜0.01)，而在6、10、14周龄体重上，DD型个体显著优于CC型个体(P＜0.05)，CD型个体表现介于两者之间，与CC型个体表现更为接近，除了第8周龄与其存在一个显著差异外(P＜0.05)，其余差异不显著。因此推测MyoG基因与鸡的早期生长发育密切相关，且BB纯合型和DD纯合型为有利基因型;就繁殖性状而言，基因型AA、AB和BB在京海黄鸡繁殖性状上无显著差异(P＞0.05);基因型CC和DD在京海黄鸡开产体重上存在显著差异(P＜0.05)，在其余性状上各基因型差异均不显著(P＞0.05)。因此，推测MyoG基因对京海黄鸡的繁殖性状无显著影响。 2.以Myf5基因为候选基因，对该基因的外显子区进行了单核苷酸多态性检测。在Myf5基因外显子处共检测到8个SNPs位点，形成了9种单倍型。最小二乘分析结果显示，在生长性状方面，单倍型组合H1H5对8周龄和12周龄体重影响显著(P＜0.05)，单倍型组合H2H6则对12周龄和14周龄体重显著影响(P＜0.05);在繁殖性状方面，单倍型组合H1H5在开产体重上为有利单倍型组合，显著高于单倍型组合H1H4和H2H4(P＜0.05)，极显著高于单倍型组合H1H3(P＜0.01)。就300天蛋重均值来说，单倍型组合H1H3为不利单倍型组合，对300天的产蛋数数据分析显示，单倍型组合H1H3的300天产蛋数极显著高于单倍型组合H1H4(P＜0.01)。因此，京海黄鸡Myf5基因外显子的多态性对其生长和繁殖性状都有一定影响， 3.在京海黄鸡群体中对MyoG基因和Myf5基因进行多基因聚合效应分析，结果显示，互作效应对6周龄、8周龄体重的影响达到了极显著水平(P＜0.01)，对300天体重影响显著(P＜0.05)，并且，对6周龄、8周龄和300天体重而言，互作型组合AB*DD为有利互作型组合。 4.对京海黄鸡MyoG基因和Myf5基因在不同生长阶段和组织中的表达规律进行研究。结果表明，MyoG基因在胸肌和腿肌中表达量较高，其中胸肌中表达水平最高。MyoG基因mRNA表达丰度在初生时最大，在4周龄时下降，10周龄时上升，之后在16周龄为最低。在0周龄和10周龄时，MyoG基因在母鸡上的表达高于公鸡。Myf5基因在胸肌、腿肌和卵巢中表达量较高，其中胸肌中表达水平最高。Myf5基因mRNA表达丰度在初生时最大，在4周龄时下降，10周龄时上升，之后在16周龄为最低。在0周龄和4周龄时，MyoG基因在母鸡上的表达高于公鸡。Myf5基因在卵巢中的表达随着日龄的增长而降低。

目录

论文说明

摘要

第一章 文献综述

1 分子标记及其在家禽育种中的应用

1．1 分子标记

1．2 单核酸标记(SNP)及其在家禽育种的应用

1．3 SNPs的检测和基因分型技术

2 实时荧光定量PCR技术

2．1 实时荧光定量PCR的技术原理

2．2 实时荧光定量PCR技术在畜牧研究领域的应用

3 生肌调节因子(MyoGenic regulatory factors，MRFs)家族简介

3．1 MyoG基因的研究进展

3．2 Myf5基因的研究进展

4 京海黄鸡品种简介

5 本研究的目的和意义

第二章 MyoG与Myf5基因多态性及其与京海黄鸡生长和繁殖性状的关联分析

第一节 MyoG基因的多态性与京海黄鸡生长和繁殖性状的关联分析

1 材料与方法

2 数据分析及统计

3 结果与分析

第二节 Myf5基因的多态性与京海黄鸡生长和繁殖性状的关联分析

1 材料与方法

2 数据分析及统计

3 单倍型分析

4 结果与分析

5 讨论

第三节 MyoG基因和Myf5部分基因型组合与京海黄鸡生长和繁殖性状的关联分析

1 材料与方法

2 数据分析及统计

3 结果与分析

4．MyoG基因和Myf5基因多态位点的互作效应分析

5 讨论

第三章 MyoG基因和Myf5基因在京海黄鸡不同生长阶段表达规律的研究

1 材料与方法

1．1 试验个体

1．2 主要实验试剂

1．3 主要仪器设备

1．4 实验方法

1．5 统计分析

2 结果与分析

2．1 RNA提取结果

2．2 PCR扩增目的基因和内参基因结果

2．3 目的基因的标准曲线和溶解曲线结果

2．4 京海黄鸡MyoG基因的表达规律

2．5 京海黄鸡Myf5基因的表达规律

3 讨论

3．1 MyoG基因的表达

3．2 Myf5基因的表达

全文结论

创新点

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

声明