小潮气量机械通气预处理对大鼠内毒素所致肺损伤的影响

摘要

目的：通过建立大鼠内毒素所致肺损伤模型，探讨小潮气量机械通气预处理对大鼠内毒素所致急性肺损伤的影响，并阐明其可能相关机制。
　　方法：成年雄性S-D大鼠48只，8～12周龄，体重250～300 g，采取随机数字表法，将其分为4组(n=12): sham组:腹腔注射0.9％生理盐水0.5ml; MV-saline组:先进行机械通气预处理1h，通气结束后予以0.9％生理盐水0.5ml腹腔注射;LPS组:大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)溶液0.5ml; MV-LPS组:先进行机械通气预处理1h，通气结束后予以LPS溶液0.5ml腹腔注射。所有大鼠术前均采用2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，术中机械通气参数设置均为潮气量6 ml/kg、 PEEP=0mmHg、频率40次/分、I∶E=1∶2、吸入气体为空气，术中腹腔注射的LPS溶液的剂量均为40 mg/kg。所有动物在完成腹腔注射6h后，统一放血处死并收集组织标本。取肺组织后，测定肺组织湿/干重比（W/D比）、伊文思蓝染料渗透率，观察肺组织病理学改变，行肺损伤评分。使用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β及IL-6的浓度，使用TUNEL染色法测定肺组织细胞凋亡指数(AI)、使用免疫组织化学和Western bolt方法测定肺组织中ROCK1蛋白的表达，使用RT-PCR法测定肺组织中RhoA mRNA、ROCK2 mRNA的表达。
　　结果：与sham组比较，LPS组、MV-LPS组大鼠肺组织损伤评分、W/D比值、AI值、肺组织伊文思蓝染料渗透率及BALF中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显升高(P＜0.05);与sham组比较，LPS组、MV-LPS组大鼠肺组织中RhoA mRNA、ROCK2 mRNA及ROCK1蛋白的表达明显上调(P＜0.05）;与LPS组比较，MV-LPS组大鼠肺组织损伤评分、W/D比值、AI值、肺组织伊文思蓝染料渗透率及BALF中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6浓度明显下降(P＜0.05）;与LPS组比较，MV-LPS组大鼠肺组织中RhoA mRNA、ROCK2 mRNA及ROCK1蛋白的表达也明显下调(P＜0.05）。
　　结论：LPS腹腔注射可导致大鼠严重的急性肺损伤，小潮气量机械通气预处理能够有效减轻LPS引起的急性肺损伤，其早期的保护效应可能与抑制RhoA/ROCK通路有关。

目录

摘要

符号说明

前言

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 实验试剂

1．3 实验仪器及设备

1．4 实验方法及步骤

1．5 统计学分析

2．实验结果

2．1 肺组织病理学改变

2．2 肺水肿及肺血管通透性改变

2．3 肺组织细胞凋亡的改变

2．4 肺组织炎症因子TNF-α，IL-1β及IL-6浓度的改变

2．5 RhoA和ROCK2 mRNA的表达

2．6 肺组织中ROCK1蛋白的表达

3．讨论

4．结论

参考文献

综述 围术期肺保护性通气策略研究的进展

读硕士学位期间主要完成论文

致谢

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