抗胃泌素释放肽前体ProGRP单克隆抗体的实验研究

摘要

抗胃泌素释放肽前体ProGRP(31-98)单克隆抗体的实验研究研究目的: 1.了解胃泌素释放肽(gastrin-releasing peptide GRP)在小细胞肺癌细胞株及组织中的表达率及表达位置。 2.研究抗胃泌素释放肽前体(pro-gastrin-releasing peptide(31-98) ProGRP(31-98)单克隆抗体E-Bs的131I标记方法、131I-E-B5的稳定性及标记后抗体免疫活性。 3.研究131I-E-B5在正常昆明小鼠及小细胞肺癌荷瘤裸鼠体内的分布情况，探讨131I-E-B5的体内药代动力学过程。 4.研究131I-E-B5对不同类型肿瘤的显像效果及最佳显像时间。 5.探讨131I-E-B5放射免疫治疗小细胞肺癌的可行性及其疗效。 研究方法: 1.采用流式细胞仪检测小细胞肺癌NCI-H446细胞株及肺腺癌A549胞株中GRP表达情况，通过免疫组化法检测人小细胞肺癌组织中GRP的表达情况。 2.E-B5的131I标记采用氯胺-T法，通过纸层析法检测标记率、放化纯，将131I-E-B5置于37℃水浴箱及与正常人血清混合后在不同时间点测定放化纯以了解其稳定性，利用细胞结合分析法测定131I-E-B5的免疫活性。 3.自昆明小鼠尾静脉注射131I-E-B5后不同时间点断颈动脉处死小鼠，同时取血液及各主要脏器组织，计算各时间点的％ID/g及药物动力学参数。建立人小细胞肺癌荷瘤裸鼠模型，自荷瘤裸鼠尾静脉注射131I-E-B5后不同时间点处死裸鼠并取各主要脏器组织，计算各时间点的％ID/g和T/NT值。 4．分别对荷小细胞肺癌、肺腺癌和大肠癌裸鼠模型进行131I-E-B5显像，观察移植瘤的显影情况并计算瘤体与对侧相同部位的T/B比值。 5.治疗实验采用瘤内注射方式，根据治疗剂量的不同，将小细胞肺癌荷瘤裸鼠随机分为未处理组、131I-E-B5治疗组和Na131I对照组，动态观察裸鼠及移植瘤生长情况，测量不同时间瘤体的大小，计算抑制率并绘制肿瘤生长曲线。 结论: 1.131I-E-B5标记率及放化纯高，在体内、体外有很好的稳定性，131I标记后的E-B5仍然保持着较好的免疫活性。 2.131I-E-B5能选择性浓聚在GRP表达阳性的肿瘤部位，对小细胞肺癌有较好的靶向作用，肿瘤局部注射后可以抑制小细胞肺癌移植瘤的生长并破坏肿瘤组织。 3.131I-E-B5有望成为一种较为理想的小细胞肺癌放射免疫显像及治疗药物，具有潜在的较为广阔的临床应用前景，值得进一步开展深入的研究。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

引言

第一部分：小细胞肺癌细胞株NCI-H446 GRP表达的检测

材料与方法

结果

讨论

第二部分：氯氨-T法131Ⅰ标记E-B5

材料与方法

结果

讨论

第三部分：131I-E-B5在正常昆明小鼠和小细胞肺癌裸鼠模型体内分布的研究

材料与方法

结果

讨论

第四部分：131I-E-B5在不同类型肿瘤裸鼠模型中的显像研究

材料与方法

结果

讨论

第五部分小细胞肺癌裸鼠模型131I-E-B5放射免疫治疗实验研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述：肺癌放射性免疫显像和治疗的研究进展

攻读学位期间公开发表的论文

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