槲皮素诱导MCF-7细胞死亡机制中自噬与凋亡相关性的研究

摘要

目的：研究槲皮素(quercetin，Que)诱导的人乳腺癌MCF—7细胞死亡中的作用，初步探讨自噬和凋亡机制在MCF—7细胞死亡中的相关性。 方法：用不同浓度的Que处理MCF—7细胞，采用MTT法测定Que对MCF—7细胞增殖的抑制作用；应用MODC荧光染色，Hochest33258染色，AO/EB染色观察给药后自噬和凋亡的发生；分别用ALLN抑制m—calpain、z—IETD—FMK抑制caspase8、E64d抑制Cathepsins，采用MTT法结合LDH漏出率、免疫荧光法和流式细胞仅研究抑制自噬与凋亡机制在Que诱导的MCF—7细胞死亡中的关系。 结果：Que对MCF—7细胞生长有显著的抑制作用，且此作用呈明显的时间、剂量依赖性：(AO/EB)和MDC荧光染色显示Que给药后可诱导MCF—7细胞发生自噬和凋亡，24h自噬和凋亡同时存在，自噬特异性蛋白LC3被激活：LDH漏出率实验结果表明，在Que给药前用3—MA阻断自噬或者氯喹(ehloroquine，Chlo)碱化溶酶体，Que对MCF—7细胞的细胞毒性作用增强；碱化溶酶体后，流式细胞仪检测结果显示，Que可使MCF—7细胞的凋亡峰提前，免疫荧光法检测发现LC3表达减少。应用caspase8抑制剂可增强Que对MCF—7细胞的抑制作用，但是cathepsins广谱抑制剂E64d能降低Que对MCF—7的生长抑制。 结论：Que能明显抑制MCF—7细胞的生长，并诱导其发生自噬和凋亡。在Que诱导的MCF—7细胞的死亡中，自噬激活能降低Que对MCF—7细胞的毒性；Que也可能通过激活溶酶体酶，促进MCF—7细胞走向自噬、凋亡或另一种死亡方式。溶酶体可能是MCF—7细胞发生自噬和凋亡的枢纽。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

第一部分Que诱导MCF-7细胞发生自噬和凋亡

引言

材料与方法

实验结果

小结

第二部分Que诱导MCF-7细胞死亡中自噬和凋亡的相关性研究

材料与方法

实验结果

小结

讨论

结论

参考文献

攻读学位期间发表的论文

附录：综述 肿瘤细胞死亡过程中自噬与凋亡的联系

致谢