磷酸化JNK在骨癌痛大鼠脊髓背角的表达及其抑制剂的抗伤害作用

摘要

第一部分：磷酸化肿JNK在骨癌痛大鼠脊髓背角的表达
　　 目的：观察磷酸化JNK在骨癌痛大鼠脊髓背角表达的变化。探讨其在大鼠骨癌痛维持中的可能作用。
　　 方法：雌性SD大鼠，体重150～170g，36只大鼠，随机分为6组（n=6）：Sham组7d、模型组7d、Sham组10d、模型组10d、Sham组18d、模型组18d。sham组胫骨髓腔注射生理盐水5μl，所有模型组胫骨髓腔注射walker256细胞（2×107/ml）5μl；分别在相应的天数灌注大鼠，取L4、5脊髓，标本置于-80℃保存。标本收齐后，冰冻切片、用免疫组织化学方法检测脊髓背角磷酸化JNK的表达。
　　 结果：与sham组相比，建模后7d脊髓背角pJNK阳性细胞数（NUM）无明显增多，积分光密度值（IOD）无明显增大；建模后10d脊髓背角pJNK阳性细胞数（NUM）增多积分光密度值（IOD）增大；建模后18d脊髓背角pJNK阳性细胞数（NUM）增多，积分光密度值（IOD）增大。
　　 结论：磷酸化JNK在骨癌痛大鼠脊髓背角表达增加。
　　 第二部分：鞘内注射SP600125对骨癌痛大鼠机械痛敏的影响
　　 目的：观察骨癌痛大鼠鞘内注射JNK抑制剂SP600125后的患侧后肢机械缩足反射阈值变化。
　　 方法：雌性SD大鼠，体重150-170g，32只大鼠，随机分为4组（n=8）：Sham组、模型组、DMSO组和SP600125组。sham组胫骨髓腔注射生理盐水5μl，其它三组胫骨髓腔注射walker256细胞（2×107/ml）5μl；建模后1d所有大鼠皆鞘内置管；建模后10d，DMSO组鞘内注射二甲基亚砜（5％）10μl，SP600125组鞘内注射SP600125（0.5‰）10μl，其余两组不进行鞘内注射；在建模前、建模后3d、5d、7d、10d和给药后1h、2h、3h、6h、12h、24h用von Frey丝测定大鼠患侧后肢机械缩足反射阈值（MWT）。
　　 结果：建模后7天大鼠开始出现机械痛敏并且随时间逐渐增强，鞘内注射SP600125后1h、2h、3h、6h、12h、24h大鼠患侧后肢MWT升高，鞘内注射后3 h是SP600125作用的高峰期，但即使在药物作用高峰期大鼠患侧后肢MWT也不能恢复到基础值。
　　 结论：鞘内注射SP600125能减轻但不能完全抑制大鼠胫骨癌痛引起的机械痛敏。