全胃肠外营养对大鼠肝脏TLRS表达的影响

摘要

目的:长期全胃肠外营养可导致肝脏相关并发症的发生,轻者仅表现为肝脏酶谱的升高,重者表现为肝脂肪样变性、胆汁淤积、胆石症、胆囊炎,甚至可以迅速发展为肝硬化及肝功能衰竭,但其具体发病机制到目前仍不清楚。Toll样受体是固有性免疫的重要组成部分,通过特异性识别病原相关分子模式,在机体免疫应答中发挥重要作用。本实验通过RT-PCR技术检测TPN支持治疗后肝脏组织Toll样受体表达的变化,探讨Toll样受体在TPN相关肝脏并发症的作用,为临床预防和治疗TPN相关肝脏并发症提供实验室依据。
　　材料与方法:选择24只SPF级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为生理盐水组,TPN组,1g鱼油组,3g鱼油组。商品化鼠粮喂养,自来水龙头供水,维持12:12小时昼夜循环,温度维持在22℃左右,相对湿度40％~60％。各组大鼠麻醉成功后,在无菌环境下经右颈静脉置入硅胶管后予进食进水两天以利于从手术应激中恢复。第3天起即通过恒流微泵持续输液一周:生理盐水组予输注生理盐水,同时进食进水;TPN组予输注TPN(配方组成详见表1);鱼油组TPN中脂肪乳更换为ω-3鱼油脂肪乳注射液,剂量分别为1g.kg-1.d-1及3g.kg-1.d-1。TPN组及鱼油组大鼠输液期间禁食禁水。各组输液量均为第1天20ml,第2天40ml,第3~7天为60ml。经上述处理后,所有大鼠颈椎脱臼法快速处死取肝脏组织,用RT-PCR方法检测肝脏组织中TLR2,3,4,5,7,9及MyD88 mRNA的表达水平.
　　结果:PCR结果显示TLR2,3,4,5,7,9及MyD88在大鼠肝脏组织中均有表达。全胃肠外营养后大鼠肝脏TLRs2,3,4,5,7,9及MyD88表达水平与生理盐水对照组相比显著上调;而鱼油组肝脏组织TLRs2,3,4,5,7,9及MyD88表达水平较TPN组显著下调,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。1g鱼油组即可达到调理的作用。
　　结论:全胃肠外营养大鼠肝脏TLRs表达水平上调,导致肝脏免疫功能的改变,而鱼油作为特定的免疫营养素通过下调TLRs表达的表达而对肝脏起到保护作用。鱼油剂量(1g.kg-1.d-1)对TLRs的表达调理作用即可显现。

目录

摘要

Abstract

前言

材料方法

1. 主要实验仪器和设备

2. 主要实验试剂和药品

3. 主要试验试剂

4. TPN 相关肠道损伤SD 大鼠模型的建立

5. 取材

6. TLRs 逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）

7. 凝胶扫描

8. 统计学处理

结果

1.TPN 组分别与NS 组、1g 鱼油组、3g 鱼油组相比肝脏TLR 表达水平的差异

2.TPN 组分别与NS 组、1g 鱼油组、3g 鱼油组相比肝脏MyD88 表达水平的差异

讨论

结论

参考文献

综述

参考文献

英汉双解缩略词

攻读学位期间公开发表的论文

致谢