干扰素刺激基因15在原发性肝癌中的表达及意义的实验研究

摘要

目的：检测干扰素刺激基因15(interferon-stimulated gene15，ISG15)在肝癌组织及在肝细胞系中的表达情况，分析探讨ISG15表达与肝癌病理特征及生物学行为的相关性。
　　 方法：收集50例手术切除并经病理证实的肝癌组织及相应的癌旁组织；培养正常胎肝细胞LO2、人肝癌细胞系HepG2及高转移肝细胞系MHCC97-H、低转移细胞系MHCC97-L。采用免疫组织(细胞)化学染色技术检测ISG15在肝癌组织及肝细胞系中的相对表达水平及定位。Westemblotting方法检测ISG15在肝癌组织、癌旁组织和肝细胞系中的蛋白表达水平。荧光定量PCR方法检测ISG15在肝癌组织、癌旁组织及不同肝细胞系中的mRNA表达水平。分析ISG15表达与肝癌的病理特征及生物学行为的相关性。
　　 结果：免疫组织(细胞)化学染色显示，ISG15在肝癌细胞的细胞核及细胞质中均有表达；ISG15在肝癌肿瘤组织中的表达高于癌旁组织，差异有统计学意义(t=-4.4，P=0.011)；在MHCC97-H中的表达明显高于MHCC97-L(t=3.5，P=0.037)，同样，在HepG2中的表达高于LO2(t=4.1；P=0.019)。Westem blotting结果显示，ISG15蛋白表达在肝癌肿瘤组织中明显高于癌旁组织，差异有显著(t=-3.4，P=0.028)；结合相应临床资料分析显示，ISG15的蛋白表达水平与年龄、性别、肿瘤大小、乙肝DNA是否阳性无明显相关性(P分别为0.36、0.85、0.57、0.35)，而与肿瘤分化程度及侵袭转移有关(P分别为0.012、0.043)；ISG15表达在HepG2中显著高于LO2(t=-4.51，P=0.011)，同样，在MHCC97-H中的表达显著高于MHCC97-L(t=5.90，P=0.004)，差异有统计学意义。在基因水平上，ISG15在肝癌肿瘤组织中的表达较癌旁组织中低(t=-2.324，P=0.027)，差异有统计学意义；在MHCC97-H中的表达明显低于MHCC97-L(t=-3.158，P=0.013)，而在HepG2中的表达高于LO2(t=-5.275，P=0.025)。
　　 结论：ISG15表达于肝癌细胞的细胞核及细胞质中，主要守蛋白水平的调控。ISG15的表达与肝癌的发生发展，尤其是与肝癌的侵袭转移能力密切相关。ISG15可成为判断肝癌侵袭转移能力及预后的可能指标之一。