慢病毒介导的B7-H3基因沉默对前列腺癌PC-3细胞转移侵袭能力的影响

摘要

目的：利用构建的RNAi慢病毒感染前列腺癌PC-3细胞，筛选出稳定转染的细胞。探索B7-H3表达下降对人前列腺癌PC-3细胞转移侵袭功能的影响。
　　 方法：1、用慢病毒感染前列腺癌PC-3细胞，puromycin选择性筛选出B7-H3基因稳定沉默的细胞，并利用RT-PCR检测各组PC-3细胞的B7-H3mRNA表达情况。实验分为三组：实验组（靶向B7-H3病毒组）、阴性对照组(NC病毒组)以及空白对照组（不感染组）。
　　 2、体外迁移和侵袭实验探讨B7-H3表达下降对人前列腺癌PC-3细胞转移侵袭功能的影响。
　　 结果：1、构建的RNAi慢病毒感染PC-3细胞后，在puromycin浓度为1.0μg/ml筛选出的稳定转染的PC-3细胞。RT-PCR结果显示，空白对照组与阴性对照组相比，无统计学差异，实验组和对照组相比，P＜0.01统计学意义，B7-H3的mRNA表达强度下降，实验组对B7-H3mRNA表达抑制率为80％。
　　 2、体外迁移实验和侵袭实验显示：实验组过膜细胞数少于空白对照组及阴性对照组，差异均有统计学意义(P＜0.01)，说明实验组细胞转移和侵袭能力下降。而对照组及阴性对照组两组间差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　 结论：构建B7-H3特异的RNAi慢病毒表达载体能有效抑制B7-H3基因的表达，可满足后续实验需要；B7-H3表达下降可以明显抑制PC-3细胞的转移和侵袭能力，说明B7-H3在肿瘤的迁移及侵袭过程中可能起了重要的作用。

目录

声明

前言

第一部分 慢病毒介导的B7-H3稳定沉默的PC-3细胞的构建及其干扰效率的鉴定

引言

材料及方法

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分 慢病毒介导B7-H3基因沉默对前列腺癌PC-3细胞侵袭转移能力的影响

引言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

综述

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