水疱性口炎病毒VSV为载体的新型病毒性心肌炎疫苗的制备及免疫机制的初步研究

摘要

B3型柯萨奇病毒(coxsackievirus B3 type, CVB3)感染可导致急性及慢性心肌炎和约50％扩张性心肌病的发生,是一常见、多发的心血管系统疾病,青壮年发病较高,因此预防 CVB3的感染是控制病毒性心肌炎的关键。临床上目前还没有疫苗或有效的治疗药物防治病毒性心肌炎,因此研制新型、高效的疫苗对于预防病毒性心肌炎显得尤为紧迫。
　　本研究通过利用水疱性口炎病毒VSV这个载体,制备了一种能有效预防 CVB3诱导的病毒性心肌炎的黏膜疫苗。我们首先构建了表达编码CVB3主要免疫原(VP1)的重组水疱性口炎病毒VSV-VP1,同时评估了VSV-VP1病毒疫苗诱导的免疫保护作用。通过滴鼻的方式给予小鼠VSV-VP1疫苗,能够诱导有效的抗原特异的粘膜免疫反应以及系统性免疫应答,特别是多功能T细胞的诱导。当给予小鼠致死剂量的CVB3攻毒时,VSV-VP1免疫组的保护效果显著好于对照组VSV-GFP和壳聚糖包裹的DNA黏膜疫苗。进一步研究发现VSV-VP1疫苗保护效果增加的一个可能原因是VSV-VP1能够刺激小鼠肠系膜淋巴结(MLN)中树突状细胞(DC)成熟比例增加。我们的研究表明以VSV为载体的病毒疫苗在小鼠模型中通过滴鼻免疫可以诱导强劲的黏膜免疫应答,有效的预防CVB3诱导的病毒性心肌炎,因此水疱性口炎病毒作为疫苗载体展现了很好的应用前景。

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前言

第一部分 VSV-VP1重组病毒的包装以及VP1蛋白的表达纯化

材料与方法

结果

讨论

第二部分 皮下免疫VSV-VP1病毒疫苗和VP1蛋白疫苗诱导的特异性免疫应答及免疫保护的差异

材料与方法

结果

讨论

第三部分 滴鼻免疫VSV-VP1诱生的CVB3特异性免疫应答及免疫保护作用

材料与方法

结果

讨论

第四部分 VSV-VP1增强黏膜免疫应答的机制初步探讨

材料与方法

结果

讨论

小结

综述：水疱性口炎病毒为载体的病毒疫苗研究进展

参考文献

附录

攻读学位期间本人出版或公开发表论著、论文

致谢