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黄金茶中总黄酮的提取纯化、结构鉴定及抗氧化活性研究

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摘要

第1章 文献综述

1.1 黄金茶的研究概述

1.1.1 黄金茶简介

1.1.2 黄金茶化学成分的研究

1.2 黄酮的研究进展

1.2.1 黄酮的结构及理化性质

1.2.2 黄酮类化合物提取方法的研究进展

1.2.3 黄酮类化合物分离纯化方法的研究进展

1.2.4 黄酮类化合物分析检测方法的研究进展

1.2.5 黄酮类化合物生物活性的研究进展

1.3 选题背景与研究内容

1.3.1 选题背景

1.3.2 研究内容

第2章 黄金茶中总黄酮超声提取工艺的研究

2.1 试验材料与仪器

2.1.1 试验原料

2.1.2 主要试剂

2.1.3 主要仪器

2.2 试验方法

2.2.1 黄金茶的预处理

2.2.2 标准曲线的制作

2.2.3 黄金茶中总黄酮得率的测定

2.2.4 单因素及正交试验

2.3 结果与讨论

2.3.1 单因素试验结果及分析

2.3.2 正交试验结果及分析

2.4 小结

第3章 黄金茶中总黄酮纯化工艺的研究

3.1 试验材料与仪器

3.1.1 材料

3.1.2 主要试剂

3.1.3 仪器

3.2 试验方法

3.2.1 黄金茶中总黄酮的纯化工艺流程图

3.2.2 溶剂萃取法对黄金茶中的总黄酮进行初步纯化

3.2.3 聚酰胺树脂纯化黄金茶中总黄酮的纯化工艺

3.2.4 聚酰胺树脂对黄金茶中总黄酮的纯化

3.3 结果与讨论

3.3.1 树脂的静态吸附解析结果

3.3.2 树脂的动态吸附解析结果

3.4 小结

第4章 黄金茶总黄酮的结构鉴定

4.1 试验材料与仪器

4.1.1 材料来源

4.1.2 主要试剂

4.1.3 仪器

4.2 试验方法

4.2.1 样品的制各

4.2.2 色谱条件

4.2.3 质谱条件

4.2.4 标准曲线的制作

4.3 结果与讨论

4.3.1 HPLC色谱图及质谱图分析

4.3.2 各质谱峰的定性分析

4.3.3 部分化合物的定量分析

4.4 小结

第5章 黄金茶总黄酮的抗氧化活性研究

5.1 试验材料与仪器

5.1.1 材料

5.1.2 主要试剂

5.1.3 主要仪器及设备

5.2 试验方法

5.2.1 DPPH自由基清除能力的测定

5.2.2 羟自由基清除能力的测定

5.2.3 超氧阴离子清除能力的测定

5.2.4 ABTS+自由基清除能力的测定

5.2.5 还原能力的测定

5.3 结果与讨论

5.3.1 黄金茶总黄酮对DPPH自由基的清除能力

5.3.2 黄金茶总黄酮对羟自由基的清除能力

5.3.3 黄金茶总黄酮对超氧阴离子的清除能力

5.3.4 黄金茶总黄酮对ABTS+自由基的清除能力

5.3.5 黄金茶总黄酮的还原能力

5.4 小结

第6章 结论与展望

6.1 论文的试验结果

6.2 实验研究中存在的不足及展望

参考文献

致谢

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摘要

黄金茶是一种具有抗菌消炎,抗病毒作用的功能性绿茶,黄酮是其中的重要功能性成分之一。本试验以黄金茶为试验材料,对黄金茶中总黄酮的提取、纯化以及抗氧化活性进行了研究,并对其结构进行了初步鉴定。试验结果如下:
  (1)通过单因素和正交试验得到超声波辅助提取黄金茶中总黄酮的最优工艺组合为:超声功率70%,乙醇浓度80%,料液比1∶20,提取时间20min,总黄酮得率为5.3493%。
  (2)对八种大孔树脂和聚酰胺树脂进行筛选,得到效果最佳的树脂为聚酰胺树脂,进一步通过静态和动态吸附解析试验确定其最佳吸附-解析条件为:洗脱剂浓度为70%,上样流速为1.5mL/min,上样液浓度为1.5mg/mL。三次纯化后黄酮的纯度由11%提高到37%。
  (3)对纯化的总黄酮进行初步的结构鉴定,采用LC-ESI-QTOF-MS/MS技术进行定性分析,得出黄金茶总黄酮化合物中可能含有以下物质:绿原酸,对香豆酰奎尼酸,咖啡酸,芦丁,金丝桃苷,维采宁-2,圣草酚-O-己糖苷,木犀草苷,同时对其中几种进行了定量分析,得出绿原酸含量为0.90%,咖啡酸含量为1.87%,芦丁含量为0.81%,金丝桃苷含量为4.79%,圣草酚-O-己糖苷含量为0.08%,木犀草苷含量为4.07%。
  (4)对黄金茶总黄酮的抗氧化活性进行探究,考察了DPPH自由基清除能力,羟自由基清除能力,超氧阴离子清除能力,ABTS自由基清除能力、还原能力。结果表明,黄金茶总黄酮具有较好的体外抗氧化能力:在相同的溶度下,黄金茶总黄酮相对于VC来说,对DPPH自由基具有更好的清除能力;对羟自由基有较好的清除能力,随浓度的增大,其清除能力逐渐增大;黄金茶中总黄酮对超氧阴离子具有较强清除能力,浓度为250μg/ml时,清除率可达89.8%;在50-100μg/ml浓度下,对ABTS+自由基的清除黄金茶总黄酮比VC效果更好,在100-250μg/ml浓度下,两者的清除效果相当;相同浓度下,黄金茶总黄酮的还原能力比VC稍弱。

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