富硒G3菌与牛初乳复配对小鼠免疫功能的影响和G3菌保藏方法初探

摘要

本文对本实验室筛选出的沼泽红假单胞菌G3菌株进行耐硒驯化，提高G3菌对亚硒酸钠的耐受性，制备富硒G3菌，将富硒G3菌与牛初乳复配形成富硒牛初乳，初步探讨了富硒牛初乳对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影响，并初步研究G3菌保藏方法，为G3菌的保藏提供一种新的思路。
　　 为了提高G3菌对亚硒酸钠的耐受性，首先对G3菌进行耐硒驯化，形成耐硒G3菌。以分批补硒补料方式对耐硒G3菌进行培养，得到富硒G3菌。以紫外分光光度法对富硒G3菌进行硒含量的测定，结果表明，富硒G3菌的总硒含量为875.033±17.176μg/g，其中，有机硒含量为847.423μg/g，有机硒转化率为96.845％。
　　 通过将富硒G3菌与牛初乳按质量比硒：牛初乳=1:20000的比例复配形成富硒牛初乳。小鼠急性毒性试验表明，富硒G3菌、牛初乳、富硒牛初乳均属实际无毒。用环磷酰胺构建小鼠免疫低下模型，对免疫低下小鼠灌胃富硒G3菌、牛初乳和富硒牛初乳，30 d 后测定各组小鼠脏器指数、白细胞数、T 淋巴细胞阳性率、血清SOD 酶活性、全血GSH-Px 酶活性，同时计算料重比。试验表明，富硒G3菌、牛初乳、富硒牛初乳均能提高免疫低下小鼠对饲料的利用率，提高SOD、GSH-Px 酶活性，增强小鼠的免疫功能，其中富硒牛初乳高剂量组效果最为显著，达到了空白对照组的水平。
　　 对小鼠肝脏、肾脏及粪便进行硒含量的测定，结果表明，灌胃不同剂量的硒均能提高小鼠组织内的硒含量，而粪便中硒含量虽有所提高，但与免疫低下模型组相比，并无显著差异。
　　 为了给G3菌的保藏提供一种经济有效的方法，同时也为G3菌的运输寻找一种便捷的方式，本试验在液体G3菌中加入十二水合硫酸铝钾对G3菌进行絮凝。通过测定絮凝率，确定十二水合硫酸铝钾的最佳加入量为每L菌液中加入10％十二水合硫酸铝钾60 ml。在絮凝后的G3菌中加入海藻糖作为保护剂，以超细陶瓷粉为载体对G3菌进行吸附固定，形成粉末状的G3菌，分别放于常温、4 ℃、-20 ℃保藏，每2个月对固定化保藏的G3菌进行有效活菌数的测定，同时，每2个月将固定后的G3菌按15％的接种量接回培养基中，观察其生长情况。
　　 结果表明，海藻糖对G3菌有较好的保护作用，G3菌的有效活菌数与海藻糖的加入量和保藏温度有关。在G3菌中添加海藻糖的量为10 g/L，保藏温度为4 ℃时能获得较好的保藏效果。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章绪论

第2章富硒G3菌的制备及其硒含量的测定

第3章富硒牛初对小鼠免疫功能的影响

第4章富硒牛初乳对免疫低下小鼠组织中硒含量的影响

第5章G3菌保藏方法的初步研究

第6章结论

参考文献

在读期间发表的学术论文及研究成果

致谢